Anvendelse af PCR-diagnostik

Mad

Polymerasekædereaktion (PCR) i molekylærbiologi er en eksperimentel metode til påvisning af virus. Det giver dig mulighed for signifikant at øge koncentrationen af ​​visse nukleinsyrefragmenter (DNA) i prøver af biologisk materiale, hvilket gør det muligt at bestemme dem (genkende) og tælle.

Analysen udføres som følger. Genetisk materiale (en blodprøve), som potentielt kan inkludere det ønskede gen, indføres i røret. Der er også placeret primere - kemisk syntetiserede segmenter af en lille længde af det ønskede gen.

DNA eller RNA-polymerase tilsættes også til beholderen, det er i stand til at lineere en nukleinsyrekæde, som er helt identisk med originalen. Den resulterende sammensætning injiceres og et sæt af fire fri nukleotider - et specielt byggemateriale til RNA eller DNA, hvoraf den ene indeholder radioaktive phosphorpartikler.

Den resulterende blanding opvarmes til 95-96 ° C, hvilket er grunden til, at to DNA-spiraler, der normalt er sammenflettet, er vævet. Derefter afkøles lægemidlet, hvorefter primrene selv binder til det ønskede område af det virale genom, hvilket forhindrer RNA (eller DNA) i at danne en dobbelt helix igen.

Ved afkøling søger polymerasen efter en fri nukleotidkæde. For funktionen af ​​dette enzym er der brug for en enkelt kæde af nukleotider. Da polymerase glider langs DNA-kæden (som en ring på et reb), er den ikke i stand til at arbejde på en dobbelt helix.

Herefter udføres en gentagen varmecyklus på grund af hvilke nukleotidkæder er adskilt. Ved hver af disse cykler af PCR øges mængden i prøven af ​​det ønskede hepatitisgen eksponentielt, og resten af ​​det genetiske materiale produceres (vokser) lineært.

Efter rensning af opløsningen fra nukleotidrester og separation ved elektroforese af DNA-kæder ved molekylvægtparameteren kan man let bestemme, om der er et ønsket gen i prøven under undersøgelse eller ej.

Fordele ved PCR

Laboratorieprøvning ved anvendelse af PCR muliggør endnu mere information end tilstedeværelsen af ​​virus-RNA. Ved at bestemme parameteren for niveauet for radioaktiv stråling er det muligt at identificere, hvor meget genetisk materiale oprindeligt var indeholdt i prøven under undersøgelse. I tilfælde af hepatitis bestemmes indikatoren for niveauet for viral belastning.

En anden fordel ved denne fremgangsmåde er den meget høje grad af følsomhed af CR-reaktionen. Det er meget højere end de klassiske metoder til at opdage virus. Ideelt er for at identificere det ønskede gen til PCR kun tilstrækkelig en virus i prøven.

Desuden er PCR helt specifik. Dens primere er designet på en sådan måde, at de fuldt ud svarer til de unikke regioner af de ønskede gener, som ingen anden sekvens har. Ligesom fingeraftryk er unikke, er der unikke nukleotidsekvenser i hvert gen.

Kvalitativ analyse af PCR

Kvalitativ analyse giver dig mulighed for kun at identificere forekomsten af ​​en virus i blodet. Denne test skal udføres for alle patienter, i hvilke der findes antistoffer mod hepatitis C i blodet. Det kan kun resultere i en af ​​to værdier: "detekteret" eller "ikke detekteret". I en sund person skal normen (referenceværdi) "ikke registreres".

Der er en særlig fortolkning af sådanne resultater af den kvalitative forskning:

  • Resultatet er "detekteret". Dette betyder, at et fragment af RNA, der er specifikt for hepatitis C-viruset, blev fundet i den analyserede prøve af biologisk materiale taget. Derfor er der et faktum, at patienten er inficeret med hepatitis C-viruset. og på dette tidspunkt inficerer det nye leverceller i kroppen.
  • Resultatet er "ikke fundet." En sådan dom viser, at der i den analyserede prøve af biologisk materiale opnået i dette laboratorium ikke blev fundet noget fragment af RNA, der er specifikt for hepatitis C-virus. Alternativt var koncentrationen af ​​RNA i patogeninfektionen i denne prøve under følsomhedsgrænsen for testen.

I den akutte fase af RNA i hepatitis C-viruset kan sådanne kvalitative undersøgelser ved PCR-metoden påvises allerede efter 1-2 uger umiddelbart efter kroppens infektion, det vil sige længe før forekomsten af ​​antistoffer mod hepatitis selv.

Upræcise testresultater af denne undersøgelse kan opnås ved:

  • forurenet biomateriale;
  • tilstedeværelsen af ​​heparin i patientens blod
  • Tilstedeværelsen i prøven af ​​kemiske eller proteinstoffer (inhibitorer), der påvirker de forskellige komponenter af PCR.

For at foretage en kvalitativ analyse af PCR er der ikke behov for særlig forberedelse af patienten til undersøgelsen. Venøst ​​blod anvendes som et materiale.

Evaluering af resultater

PCR-test af høj kvalitet har en vis grad af følsomhed, og afhængigt af undersøgelsens nøjagtighed og niveauet af udstyr i laboratoriet kan variere fra 10 til 500 IE / ml.

Dette betyder, at hvis viruset i blodprøven er til stede i en meget lav koncentration (mindre end tærskelværdien af ​​følsomheden af ​​dette laboratorium), kan resultatet bestemmes som "ikke detekteret" hos en patients patient. På grund af dette er det i forbindelse med en kvalitativ analyse af PCR med et lavt niveau af viremia (lav viruskoncentration) for eksempel patienter, der gennemgår antiviral terapi, meget vigtigt at kende følsomhedstærsklen for dette diagnostiske system.

Varianter af diagnostiske systemer

For at kontrollere det virologiske respons anbefales det at anvende diagnostiske systemer med en følsomhedstærskel på mindst 50 IE / ml til antiviral behandling. Disse kriterier er opfyldt, for eksempel med Cobas Ampicolor HCV-test analysatorer (præcis til 50 IE / ml) samt RealBest HCV RNA (med en følsomhed på 15 IE / ml).

Ifølge WHO's anbefalinger, for at etablere en endelig diagnose af hepatitis C, er det nødvendigt kun at basere på basis af tre gange detektion af C-virus-RNA i patientens serumprøver i mangel af andre sorter af hepatitismarkører.

Foruden PCR-metoder anvendes en TMA-analyse (transkriptionel amplifikationsmetode) også til at detektere HCV RNA hos patienter. Den har den bedste følsomhedstærskel (5-10 IE / ml), men i vores land er en sådan testmetode endnu ikke meget almindelig.

Område af detekterbare virus modifikationer

En sådan kvalitativ bestemmelse i serum af tilstedeværelsen af ​​RNA i hepatitis C-viruset gør det muligt at bestemme flere genotyper af denne virus. I øjeblikket ved videnskaben mere end seks genotyper af denne virus, såvel som omkring 10 subtyper af denne sygdom.

I vores land er fælles vira 1, 2, 3 genotyper. Laboratorier kan opdage følgende genotyper: 1a og 1b, 2a, 2b og 2c, samt 3, 4, 5a og 6, uanset subtypen. For alle virusmodifikationer er detektionsspecificiteten 100%.

PCR kvantitativ analyse

Ved hjælp af en kvantitativ PCR-test bestemmes koncentrationen af ​​hepatitisvirus i blodprøver (virusbelastning). Denne test for viremia (viruskoncentration) giver dig mulighed for at bestemme antallet af enheder af et bestemt genetisk materiale (det mest virale RNA), som detekteres i en vis mængde. I dette tilfælde bestemme dens koncentration i 1 ml, hvilket svarer til 1 cu. cm.

Analysens kvantitative parametre er udtrykt i tal. I denne forbindelse anvendes internationale enheder (IE) pr. Milliliter (ml), benævnt IE / ml, som måleenheder. Nu i nogle laboratorier kan mængden af ​​virus bestemmes i andre enheder: Antallet af kopier pr. Ml er angivet som kopier / ml.

  • Datoer. For hepatitis C udføres en sådan kvantitativ analyse af PCR umiddelbart før behandlingens start. Derefter den 1., 4., 12. og 24. uge. Evaluering i den 12. uge er vejledende, det gør det muligt at bestemme effektiviteten af ​​terapien.
  • Forberedelse til analyse. Til den kvantitative analyse af PCR kræves der ikke noget specielt forberedelse af patienten til undersøgelsen. En halv time før prøveudtagning skal ikke ryge. Venøst ​​blod anvendes som laboratoriemateriale.

Evaluering af resultater

For forskellige laboratorietestsystemer er der forskellige konverteringsfaktorer for denne indikator i IE / ml. I gennemsnit tager de en konverteringsparameter, hvor 4 kopier / ml = 1 IE / ml. Det vil sige, hvis laboratoriet giver resultatet af PCR-analyse 2,4 * 10 6 kopier / ml, så skal denne parameter opdeles i 4, og vi får 6 * 10 5 IE / ml.

En belastning på 800.000 IE / ml betragtes som høj, hvilket omtrent svarer til 3.000.000 eksemplarer / ml. Lav viremi, ifølge nogle forfattere, svarer til parametrene for kvantitativ PCR under 400.000 IE / ml.

Som resultat af den kvantitative test kan de endelige resultater leveres ikke i form af en digital værdi, men: "under måleområdet" eller "ikke detekteret".

  • Vurdering: "under måleområdet." Dette antyder, at den kvantitative test ikke kunne detektere hepatitis C viral RNA, men selve viruset er til stede i kroppen i meget lave koncentrationer. Dette fremgår af en yderligere kvalitativ test, der bekræfter faktoren af ​​tilstedeværelsen af ​​viruset.
  • Rating: ikke fundet. Dette resultat indikerer, at den kvantitative test ikke blev fundet i prøven af ​​virus-RNA'et.

Parameteren for viral belastning bestemmer først og fremmest graden af ​​infektiøsitet af sygdommen, niveauet af "infektiøsitet" af patienten. Jo højere patientens viruskoncentration er, jo større er sandsynligheden for at overføre den til andre mennesker. For eksempel under samleje med en syg person eller vertikalt. Denne kvantitative indikator hjælper også med at bestemme effektiviteten af ​​behandlingen af ​​patienten.

Gennemførelsen af ​​en kvantitativ analyse af CCP er vigtig for antiviral terapi, vurderingen af ​​dens succes og planlægning af kursets varighed. Således med en hurtig reaktion fra kroppen til behandling og en lav grad af viremi, kan varigheden af ​​behandlingen forkortes.

Hvis den kvantitative PCR-parameter reduceres langsomt, bør antiviral terapi forlænges eller ændres. Hvis niveauet af viral belastning er lav, er dette en gunstig faktor for terapi, men hvis den er forhøjet, er den anvendte metode ineffektiv, og stofferne eller metoderne til deres anvendelse bør ændres.

PCR-analyse for hepatitis C

Diagnose af hepatitis omfatter en række tests til bestemmelse af tilstedeværelsen af ​​en virus i blodet. En af måderne til at opdage en sygdom er en sådan forskningsmetode som PCR for hepatitis C. Hvad er det, hvorfor er analysen af ​​PCR for hepatitis så vigtig som den udføres og dechiffreres?

Hvad er det

Polymerasekædereaktion eller PCR anvendes til at diagnosticere mavesår, colitis, enteritis. Men den største fordel ligger i, at det hjælper med at detektere både hepatitis C-viruset og antistoffer i kroppen, som har evnen til ikke at forårsage immunsystemreaktioner på grund af deres evne til at mutere.

Undersøgelsen og dens essens ligger i skabelsen af ​​visse betingelser under hvilke kædereaktionen af ​​hepatitis RNA forekommer. Hvis der i sammenligning med nukleotidsekvensen af ​​hepatitis C-viruset findes tilfældigheder, hvilket tyder på, at der er viruspartikler i blodet, og der opstår desintegrationsprocesser i leveren. Hvis mængden af ​​virus er under et bestemt niveau, laves en negativ diagnose, og hvis højere, en positiv en.

Der findes to typer blodprøver ved hjælp af PCR-metoden til hepatitis: kvantitativ analyse og kvalitativ analyse.

Kvantitativ PCR, som nævnt ovenfor, bestemmer koncentrationen af ​​RNA i hepatitisviruset. Desuden er han i stand til at give information om intensiteten med hvilken patologien udvikler sig og effektiviteten af ​​den foreskrevne behandling. En kvantitativ analyse af hepatitis C er yderst vigtig, fordi det løser modstand mod virkningen af ​​antivirale lægemidler og giver dig mulighed for at justere behandlingen.

Efter at patienten har gennemgået en behandling, hjælper PCR med at bestemme den videre rækkefølge af aftaler. I nogle tilfælde er behovet for yderligere undersøgelser. For eksempel, hvis niveauet af ALP er forøget (men ikke mere end 2 gange inden for seks måneder), og transskriptionen af ​​analysen indikerer en viral belastning over 105 IE / ml, ordineres patienten en biopsi. Hvis en kvantitativ analyse af PCR afslører en stærk inflammation og fibrose, ordineres patienten et behandlingsforløb med antivirale lægemidler.

I situationer hvor et stort antal virale partikler kombineres med et højt ALT, skal patienten straks behandles uden yderligere diagnostiske foranstaltninger.

Tage denne test og find ud af, om du har leverproblemer.

Kun kvalificerede og erfarne specialister kan dechifitere kvalitativt i kvantitativ analyse af blod til hepatitis, og moderne teknologier hjælper med at gøre dette med en lav koncentration af viruset i blodet.

Kvalitativ analyse af PCR er rettet mod at bestemme og bekræfte den faktiske tilstedeværelse af viruset i kroppen. Det udføres, når antistoffer mod hepatitis opdages i blodet. Det er en kvalitativ analyse af hepatitis, der garanterer nøjagtigheden af ​​resultatet med 100% og giver dig mulighed for at foretage en diagnose i de tidlige stadier af sygdommen, hvilket gør det muligt at starte kampen mod hepatitis allerede i de første uger efter infektion og øger chancerne for fuldstændig opsving (i tilfælde af sygdomstype B).

Fordele ved PCR

I undersøgelsen ved hjælp af PCR og dechiffrering af en blodprøve for hepatitis, kan du også bestemme patogenens genotype. I alt er der seks genotyper af viruset og et stort antal subtyper, men i vores region er 1, 2 og 3 genotyper blevet almindelige.

Andre fordele ved denne type diagnose er:

  • høj nøjagtighed af de opnåede indikatorer og lav sandsynlighed for fejl i dem
  • høj følsomhed over for virale partikler i blodet
  • muligheden for at identificere flere patogener på én gang
  • diagnose af patogene intracellulære mikroorganismer med høj antigenvariation
  • At arbejde med afkodningen af ​​analysen for hepatitis gør det muligt at opdage skjulte strøminfektioner.

Hvem er udpeget

Følgende kategorier af mennesker skal passere PCR-analysen for hepatitis:

  • gravide kvinder;
  • sundhedspersonale;
  • potentielle blod- og organdonorer;
  • dem, der har karakteristiske tegn på sygdommen
  • HIV-inficerede individer;
  • stofmisbrugere
  • person, promiskuøs.

Hvordan udføres analysen, og der kræves træning for det

Blodprøveudtagning til PCR udføres fra en vene. Som regel sker dette om morgenen, før personen har spist, for efter at have spist et måltid skal mindst 8 timer passere. I ekstreme tilfælde kan blod tages til undersøgelse om dagen eller aftenen, men tidsgabet mellem analyse og fødeindtag skal være mindst 5 timer.

Den menneskelige faktor kan kvantitativt påvirke resultaterne: deres nøjagtighed falder i nogle tilfælde fra 100% til 95%, derfor er det nødvendigt at forberede bloddonation på forhånd. Kvaliteten af ​​biomaterialet til analyse vil være hensigtsmæssigt, når patienten følger følgende regler:

  • før du giver blod, kan du kun drikke rent vand
  • to dage før undersøgelsen er det nødvendigt at nægte at acceptere stegte og fede fødevarer samt alkoholholdige drikkevarer
  • en dag før laboratoriet skal stoppe med at tage medicin. Hvis dette ikke er muligt, er det afgørende at underrette laboratorietekniker og den behandlende læge;
  • dagen før du skal undgå stressede situationer og fysisk anstrengelse
  • ultralyd, røntgen og instrumentelle undersøgelser bør ikke udføres kort før bloddonation;
  • i timen før analysen skal du afstå fra at ryge
  • 20 minutter før du donerer blod, skal du blive distraheret, roen ned og trække vejret ud.

Hvis et barn under 5 år passerer undersøgelsen, skal forældrene sørge for, at han drikker kogt vand hvert 10. minut i en halv time, før biomaterialet tages.

Dekryptering af de modtagne data

Afkodningen af ​​analysen kan repræsenteres af ord (i tilfælde af et kvalitativt studie), for eksempel "ikke detekteret" eller "under ændringsområdet". I det første tilfælde indikerer dette, at infektionen ikke blev registreret. I den anden - at viruset er til stede, men i små mængder. Denne situation kræver genforskning.

Viral belastning bestemmes af mængden af ​​infektiøs RNA og kaldes IE / ml eller kopier / ml.

En normal indikator (norm) for en kvantitativ analyse for hepatitis C er intervallet fra 1,8x102 til 2,4x107 IE / ml.

Koncentrationen af ​​virus i blodet kan være:

  • lav: fra 600 IE / ml til 3x10 4 / ml;
  • medium: fra 3x10 4 IE / ml til 8x10 5 IE / ml;
  • høj: mere end 8x10 5 IE / ml.

Kvantitativ og kvalitativ analyse af PCR for hepatitis tillader at bestemme tilstedeværelsen af ​​viruset i kroppen og niveauet af dets koncentration. En multidimensionel kædereaktion er i stand til at diagnosticere sygdommen i sine tidlige stadier, men for dette er det nødvendigt, at patienter så hurtigt som muligt kontakte medicinske institutioner for at få hjælp og nøje følge henstillingerne fra den behandlende læge.

Sådan udføres analysen ved hjælp af PCR: beskrivelse af proceduren

Polymerasekædereaktion har været kendt i 30 år. Det er almindeligt anvendt på mange områder, fra arkeologi til genetik.

Det er PCR-metoden, der hjælper med at etablere faderskab, men oftest bruges det til at identificere forskellige infektionssygdomme i menneskekroppen.

Hvordan udføres PCR-analyse, og hvad er det? Vi vil forsøge at besvare disse spørgsmål i detaljer.

PCR analyse - hvad er det?

Polymerasekædereaktion (PCR) er en højpræcisionsmetode for molekylærgenetisk diagnostik, der gør det muligt at opdage forskellige infektiøse og arvelige sygdomme hos mennesker, både i de akutte og kroniske stadier, og længe før sygdommen kan manifestere sig.

PCR-metoden er helt specifik og udføres korrekt, kan ikke give et falsk positivt resultat. Det vil sige, hvis der ikke er nogen infektion, vil analysen aldrig vise, hvad det er. Derfor er det nu meget ofte for godkendelse af diagnosen, at der tages en yderligere PCR-analyse for at bestemme årsagsmidlet og dets natur.

Polymerasekædereaktion (PCR) i 1983, udviklet af Carey Mulllis (USA), for hvilken han i 1993 blev tildelt Nobelprisen i kemi.

Hvad er fordelen ved denne metode?

Diagnose ved denne metode gør det muligt for en at finde patogenet direkte i genet, der er indeholdt i de undersøgte materialer. Dette er den mest nøjagtige analyse af kønsinfektioner, skjulte infektioner, forskellige seksuelt overførte sygdomme.

Forskelle PCR diagnostik fra andre metoder til laboratorieforskning er som følger:

  • Metoden er rettet mod at identificere selve patogenet;
  • PCR diagnose er universel: til påvisning af flere patogener;
  • sygdomme er kun en biologisk prøve af patienten tilstrækkelig;
  • Metoden er meget følsom og ledsages ikke af andre krydsreaktioner.

Desuden er fordelene ved PCR-diagnostik, at ethvert biologisk materiale af patienten er egnet til analyse: blod, udledning fra kønsorganerne, urin, sæd.

Hvilke infektioner kan detektere smøring på PCR?

Et stort antal patogener kan være til stede i kroppen, herunder de "skjulte" dem, der ikke manifesterer sig i lang tid.

Smøreanalysen på PCR gør det muligt at afsløre sådanne infektioner:

Testmaterialet til PCR er sædvanligvis sputum, spyt, urin og blod. Før analysen skal du omhyggeligt forberede dig på det, efter at have fået en indledende konsultation med en læge.

Blod til PCR gives normalt på tom mave. Gode ​​resultater viser analyse, når materialet til undersøgelsen er taget fra livmoderhalskanalen eller urinrøret. I dette tilfælde er det bedst at udføre PCR-diagnostik senest en dag efter samleje.

Varianter af PCR

PCR anvendes i mange områder til analyse og i videnskabelige forsøg. Der findes forskellige analysemetoder:

  1. Reverse transkriptions-PCR (Reverse Transcription PCR, RT-PCR (engelsk)) anvendes til at amplificere, isolere eller identificere en kendt sekvens fra et RNA-bibliotek.
  2. Inverteret PCR (Inverse PCR (Eng.)) - anvendes, hvis kun en lille del er kendt inden for den ønskede sekvens. Denne metode er især nyttig, når det er nødvendigt at bestemme tilstødende sekvenser efter DNA-insertion i genomet.
  3. Nested PCR (Nested PCR) anvendes til at reducere antallet af reaktionsbiprodukter. To par af primere anvendes og to på hinanden følgende reaktioner udføres.
  4. Asymmetrisk PCR (asymmetrisk PCR) udføres, når det er nødvendigt at amplificere hovedsageligt en af ​​kæderne i det oprindelige DNA. Anvendes i nogle sekventerings- og hybridiseringsassays.
  5. Kvantitativ PCR (Kvantitativ PCR, Q-PCR (Eng.)) Eller realtids-PCR bruges til direkte at observere måling af mængden af ​​et specifikt PCR-produkt i hver reaktionscyklus.
  6. Trin PCR (Touchdown PCR (Eng.)) - ved hjælp af denne fremgangsmåde reduceres effekten af ​​uspecifik binding af primere.
  7. Gruppespecifik PCR (gruppespecifik PCR) - PCR for beslægtede sekvenser inden for en eller mellem forskellige arter ved anvendelse af konservative primere til disse sekvenser.

Hvis nukleotidsekvensen af ​​en matrix er delvist eller ukendt, er det muligt at anvende degenererede primere, hvis sekvens indeholder degenererede positioner, hvori eventuelle baser kan lokaliseres. For eksempel kan primer-sekvensen være:... ATH..., hvor H er A, T eller C.

Hvilke biologiske materialer undersøges?

Materialet til PCR-undersøgelser, hvor udenlandsk bakterielt DNA kan detekteres eller virusets DNA eller RNA, kan bestå af forskellige biologiske medier og humane væsker:

  1. Urin. Det kan bruges til infektion i urogenitalt indgreb i mænd og urinorganer hos kvinder (hos mænd er brugen af ​​urin som et materiale erstatning for epitelskrabning).
  2. Opspyt. Det bruges til at diagnosticere tuberkulose og mindre almindeligt at diagnosticere respiratoriske former for chlamydia og mycoplasmosis. Sputum i en mængde på 15-20 ml opsamles i en steril (engangs) flaske.
  3. Biologiske væsker. Prostatajuice, pleural, cerebrospinal, fostervand, ledvæske, bronchoalveolær lavage, spyt opsamles ifølge indikationer.
  4. Epitelskrabninger fra slimhinder. Almindeligvis brugt til at diagnosticere seksuelt overførte sygdomme, såsom gonoré, klamydia, mycoplasmosis, ureaplasmose, trichomoniasis, gardnerellezis, herpetic og andre infektioner, der påvirker slimhinderne.
  5. Biopsier. De mest anvendte biopsier i mave og tolvfingertarmen for at identificere Helicobacter pylori infektion.
  6. Blod, plasma, serum. Anvendes til PCR-analyse af hepatitis B, C, D, G-vira, herpes, CMV, HIV, humane gener.

Hvordan forbereder man sig på analysen?

Pålideligheden af ​​PCR-resultatet er direkte afhængig af, at materialet er korrekt til undersøgelse. Materialet bør ikke være forurenet, ellers vil resultatet af undersøgelsen ikke være objektivt. De vigtigste anbefalinger inden indgivelse af PCR-analyse er følgende krav:

  1. Urin leveres om morgenen i en steril beholder.
  2. En blodprøve for infektion skal tages på en tom mave om morgenen.
  3. Det er ikke nødvendigt at vise seksuel aktivitet dagen før analysen.

Resultatet af analysen vil være klar i 1,5-2 dage efter proceduren. Der er situationer, hvor resultatet kan udarbejdes samme dag.

Afkodning af analysen af ​​CRP

Fortolkningen af ​​den præsenterede forskning skelnes af dens enkelhed. Resultaterne af PCR-analysen kan opnås i 1,5-2x dage efter afgivelsen af ​​materialet. I nogle tilfælde er resultatet klar på den allerførste dag, og det er det, de kan betyde:

  • Et negativt resultat indikerer, at det infektiøse middel mangler i det diagnosticerede materiale.
  • Pcr positiv betyder, at patogenet DNA eller RNA er til stede i den menneskelige krop.

I nogle tilfælde producerer en kvantitativ bestemmelse af mikroorganismer. Dette gælder især for sygdomme forårsaget af betinget patogene mikroorganismer. Da disse bakterier viser deres negative virkning kun med overskydende mængder.

Også kvantitativ analyse af PCR er vigtig for valget af terapeutisk taktik og for at kontrollere behandlingen af ​​virale infektioner som HIV og hepatitis virus.

Hvor præcist er PCR diagnose af infektioner?

PCR-metoden er kendetegnet ved høj nøjagtighed, specificitet og følsomhed. Det betyder, at denne analyse er i stand til:

  • nøjagtigt bestemme tilstedeværelsen eller fraværet af infektion
  • Angiv præcis, hvilken form for infektion (specificitet);
  • detekterer infektion selv med meget lavt DNA-indhold af mikrober i biologisk materiale,
  • som har været genstand for forskning (følsomhed).

PCR-analyse: pris og tid

Prisen på en bestemt analyse afhænger af hvilken infektion du kontrolleres for. Omtrentlige priser og vilkår:

  1. STI: 300-500 rubler, tid - 1 dag;
  2. Epstein-Barr-virus, humant papillomavirus, herpes, cytomegalovirus: 300-500 rubler, tid - 1 dag;
  3. Hepatitis A, B, C, D, G: kvalitativ analyse af 650 rubler, kvantitativ analyse af 2000 rubler. Vilkår - op til 5 dage
  4. Antistoffer mod hepatitis C-viruset, total (Anti-HCV) - 420 rubler;
  5. Antistoffer mod hepatitis C-virus, IgM (Anti-HCV IgM) - 420 rubler;
  6. Helicobacter pylori (Helicobacter pylori): 300-400 rubler, vilkår - 1 dag;
  7. HIV (antistoffer og antigener) - 380 rubler;
  8. HIV RNA, kvalitativt - 3.500 rubler;
  9. HIV RNA, kvantitativt - 11.000 rubler.

For at spare penge kan du vælge en fast sats af analyser. Denne service leveres af de fleste klinikker, hvor det er muligt at bestå analysen ved hjælp af ERP-metoden (invitro, onclinics osv.).

PCR-assays

Polymerasekædereaktion betragtes som en af ​​de mest præcise og hurtige diagnostiske metoder til mange infektionssygdomme. Det anvendes også med succes i kriminologi for at forenkle processen med at identificere kriminelle, med hjælp er fædre etableret med høj præcision.

Essensen af ​​PCR-metoden

Hver levende organisme, herunder bakterier og vira, har unikke gener, som er inkluderet i strukturen af ​​DNA eller RNA i en bestemt sekvens. Under PCR-undersøgelsen kopieres det genetiske materiale gentagne gange under indflydelse af DNA-polymerase og specielle temperaturcykluser.

Der er to hovedmetoder for polymerasekædereaktion:

  1. Den klassiske metode er udvælgelsen af ​​patogenens genetiske materiale ved elektroforese;
  2. PCR i "realtid".

Teknikken består af tre hovedfaser:

  • Prøveforberedelse;
  • DNA amplifikation;
  • Detektion (identifikation) af det genetiske materiale af det mistænkte patogen.

For at gennemføre en undersøgelse skal PCR laboratoriet opdeles i 3 zoner, hver fase af reaktionen udføres strengt i det rum, der er beregnet til det. Hver zone skal udstyres med det nødvendige udstyr, dispensere, forbrugsstoffer, beskyttelses tøj, der kun anvendes i dette rum.

Efter registrering og mærkning af prøver i prøvepræparationsrummet isoleres patogen-DNA'et eller RNA'et fra det undersøgte materiale ved udsættelse for en bestemt temperatur og specielle reagenser. Så begynder amplifikationsprocessen - skaber mange kopier af et unikt DNA-fragment. Den består af 3 hovedfaser:

  • DNA denaturering - under indflydelse af høj temperatur (95 grader) unger DNA dobbeltkernen i 2 kæder.
  • Primer Annealing - Særlige syntetiske forbindelser (primere), der er identiske med den genetiske information i enderne af de ønskede nukleinsyrefragmenter, er bundet til DNA-kædens termini. Den temperatur, der kræves til primerfastgørelse, er individuel i et bestemt tilfælde, det ligger fra 50 til 65 ° C.
  • Ved hjælp af DNA-polymerase enzym, ved 70-72 grader mellem to primere, afsluttes et tilsvarende afsnit af DNA (amplicon). Som "byggemateriale" tilføjes specielle stoffer til røret.

Amplifikationscykler gentages flere gange, derfor kopieres det ekstraherede DNA gentagne gange, hvilket forenkler processen med dens identifikation. Identifikation kan udføres visuelt efter proceduren for elektroforese af amplifikationsprodukter i en agarosegel eller automatisk ved anvendelse af realtids teknik.

I undersøgelsen af ​​PCR i "realtid" opstår amplifikation og detektion samtidigt i specielle enheder. Denne metode er mest foretrukket, da undersøgelsen udføres i lukkede rør, hvilket reducerer risikoen for kontaminering og følgelig udstedelsen af ​​falsk positive resultater.

Fordele og ulemper ved metoden

  • Undersøgelsen tager kun få timer i modsætning til de lange klassiske mikrobiologiske metoder;
  • Høj specificitet fra 95% til 100%, fordi det ønskede DNA-fragment er unikt for hver specifik mikroorganisme;
  • Metodenes høje følsomhed er det muligt at detektere patogenet, selv om det er repræsenteret i den undersøgte undersøgelse med kun en celle;
  • Identificere patogenet kan være både kvalitativ og kvantitativ metode. Dette er meget vigtigt i isolering af betinget patogene mikroorganismer, som i en lille mængde ikke forårsager sygdom;
  • Evnen til at bestemme patogenens genotype (hepatitis C, HIV-infektion). Det er nødvendigt for en rationel behandling og prognose af mulige komplikationer;
  • Evnen til at identificere en genetisk prædisponering for sygdommen og dermed forhindre dens udvikling.
  • Næsten enhver kilde til infektion kan identificeres, og moderne teknikker tillader også påvisning af aggregeret mikroflora i prøven under undersøgelse, for eksempel vaginalbiokenosen.
  • Muligheden for at opnå både en falsk positiv og en falsk-negativ prøve, hvis reglerne for at tage en prøve ikke følges, og der foretages fejl under undersøgelsen;
  • Kostprisanalyse.

ansøgning

Næsten enhver prøve kan undersøges ved hjælp af PCR (blod, urin, cerebrospinalvæske, skrabninger fra livmoderhalskanalen og urinrøret, hårsækkene, sæd osv.). Denne metode anvendes i vid udstrækning til diagnosticering af STD'er (gonoré, klamydia, ureaplasmose, mycoplasmosis, trichomoniasis). Det kan bruges til at identificere de forårsagende midler af tuberkulose, difteri, lungebetændelse, viral hepatitis, HIV-infektion, toxoplasmose, cytomegalovirus og herpesinfektion, salmonellose etc.

En polymerasekædereaktion anvendes til at etablere faderskab ved at sammenligne moderens og barnets DNA, identificere genetiske abnormiteter og arvelige dispositioner af kroppen til forskellige sygdomme.

Forberedelse til analysen

  • Blod anbefales at donere strengt på en tom mave.
  • Inden du tager et smear fra urinrøret eller livmoderhalsen, er det nødvendigt at afstå fra sex i tre dage, er det nødvendigt at tage analysen ikke tidligere end en måned efter afslutningen af ​​antibiotikabehandlingen, ellers kan resultatet være fejlagtigt. Selv det døde patogen er påvist ved PCR-metoden, derfor er det bedre at gennemføre undersøgelsen, efter at cellerne er fuldstændigt fornyet.
  • Urin samles i en steril beholder.

Svaret vil oftest være klar om et par dage afhængigt af laboratorieevnen.

Afkodningsresultater

Ved anvendelse af en kvalitativ teknik kan der kun være 2 mulige svar: positiv eller negativ. Et positivt resultat indikerer tilstedeværelsen af ​​den udskillede mikroorganisme i prøven, en negativ indikerer fraværet.

Det kvantitative resultat skal vurderes af den behandlende læge, en individuel tilgang anvendes i hvert enkelt tilfælde. Specialisten tager i betragtning spørgsmålet om behovet for behandling, doseringen af ​​lægemidler, angiver form og stadium af sygdommen, under hensyntagen til det modtagne svar.

Ved bestemmelse af den genetiske profil (prædisposition til trombofili, brystkræft) efter dechiffrering af resultatet kan lægen vurdere graden af ​​risiko for at udvikle sygdommen samt ordinere en særlig kost, forebyggende foranstaltninger.

Var siden hjælpsom? Del det i dit yndlings sociale netværk!

Hvad er PCR-analyse og viral belastning?

Polymerasekædereaktion (PCR) er en laboratoriemetode til bestemmelse af DNA og RNA. Det blev først testet for næsten et halvt århundrede siden af ​​den amerikanske Carey Mullis. Denne overfølsomme analyse er i stand til at identificere genombæreren ved hjælp af et enkeltkildemolekyle indeholdt i blod, spyt eller hud.

PCR-metoden har gode udsigter, anvendes ikke kun i medicin, men også inden for genteknologi og retsmedicinsk videnskab. Med det, klon og oprette nye typer af DNA, bestemme graden af ​​slægtskab. En kriminel identificeres af et epithelium, der findes på kriminalitetsscenen.

PCR-analyse for hepatitis - hvad laver de og hvorfor?

Hvorfor er en PCR-analyse nødvendig for mistænkt hepatitis C, hvad er det?

Hepatitis C-virus er en RNA-virus, der indeholder 6 genotyper og op til 500 subtyper. Af alle hepatitis har denne virus den højeste mutationskapacitet og overvinder den beskyttende barriere i immunsystemet. Af det samlede antal hepatitis tilfælde forårsagede C-virus 70% af tilfældene af den kroniske form og 30% af cirrose og levercancer.

Essensen af ​​metoden: En del af genet under undersøgelse ved hjælp af specielle enzymer og betingelser, der tvinger til at formere sig in vitro. PCR-analyse gør det muligt at bestemme virusstammen, uden hvilken det er umuligt at gennemføre effektiv behandling: Hver genotype er forskelligt følsom overfor antivirale lægemidler. Der anvendes to typer PCR:

Antiviral terapi kræver konstant overvågning for hurtigt at justere behandlingen, og til disse formål anvendes polymerasekædereaktion også.

Kvalitativ og kvantitativ PCR

PCR kvalitativ på hepatitis C giver svaret: Er der en stamme af virus C i patientens blod og hvilken. Genotyping er nødvendig for at tydeliggøre diagnosen, prognosen for sygdommen og bestemme tidspunktet for behandlingen.

Ifølge den accepterede klassifikation er et gen angivet med et tal, og en undertype er et lille latinsk brev.

Særligt præparat baseret på naturlige stoffer.

Pris af stoffet

Behandlingsanmeldelser

De første resultater mærkes efter en uge med administration.

Læs mere om stoffet

Kun 1 gang om dagen, 3 dråber

Instruktioner til brug

Dekryptering af genotype C-virusbordet:

  • Genotype 1a, 1b, 1c
  • Genotype 2a, 2b, 2c, 2 d
  • Genotype 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
  • Genotype 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
  • Genotype 5 a
  • Genotype 6 a

De mest almindelige genotyper 1,2,3. I Rusland er de mest almindelige 1a, 1b, 2 og 3 stammer af virus C.

Genotypen af ​​virus 1b er vanskeligere end andre at behandle, i 90% bliver det kronisk, hvoraf 30% genfødes som levercancer eller cirrose.

Genotyper 2a og 3a har en grad af kroniskitet på 33-50%, mere responsive overfor antiviral terapi.

Ved bekræftelse af virusets tilstedeværelse udføres en kvantitativ PCR-test for hepatitis C, som bruges til at beregne antallet af RNA-molekyler til stede i patientens laboratorieprøve.

Dekodningsanalyse

PCR-analyse af høj kvalitet har to svar:

PCR-negativ betyder, at patogenet ikke er påvist i blodprøver.
Et positivt svar antyder det modsatte: RNA af en eller anden genotype af virus C er fundet.

Sandsynligheden for pålideligheden af ​​resultatet er 95%. De resterende 5% er en fejl forårsaget af en person. Denne mulighed er tilladt på grund af de høje krav til undersøgelsen:

  • regler for opbevaring af reagenser
  • passende kvalifikationer for læger
  • biomaterial renhed.

PCR-kittet selv har 100% diagnostisk nøjagtighed.

Kvantitativ PCR af Hepatitis C RNA gør det muligt at bestemme viral belastningen på patientens krop. Med sin hjælp:

  • sygdomsfasen er specificeret (akut, kronisk);
  • bestemmer effektiviteten af ​​antiviral behandling
  • Behovet for en leverbiopsi undersøges.

I nogle tilfælde føler patienten ikke tegn på sygdommen, mens HCV-infektionen påvises ved PCR-metoden. Dette betyder, at sygdommen er på et tidligt stadium af udvikling eller i kronisk form. Yderligere undersøgelser er nødvendige for at afklare diagnosen, til den tidlige start af antiviral behandling.

Hepatitis C viral belastning

Viral belastning viser aktiviteten af ​​hepatisk virus, hvor aktiv reproduktionen forekommer.

Hvad er det her?

PCR-kvantitativ hepatitis C måles i internationale enheder pr. 1 ml eller IE / ml, hvilket betyder, hvor mange kopier af ribonukleinsyre af en bestemt stamme af virus C findes i 1 ml blod under test.

Hvad er højt, hvad er lavt?

Virusanalysen tillader at bestemme tilstedeværelsen af ​​viralt RNA i en koncentration på 50 IE / ml. Normal viral belastning er, når intet HCV RNA molekyle detekteres ved PCR.

Viral load bord:

  • lav koncentration på 600 IE / ml 3 * 104 IE / ml;
  • mediumkoncentration fra 3 * 104 IE / ml til 8 * 105 MM;
  • højt niveau mere end 8 * 105 IE / ml.

Lav viral belastning er et signal om, at terapeutisk behandling er valgt korrekt, og prognosen for en kur mod hepatitis C er gunstig.

En høj koncentration af virale celler indikerer, at sygdommen er i den akutte fase. Patientens blod er en farlig kilde til infektion.

Viral belastning, hvis indikatorer er på et gennemsnitligt niveau, karakteriserer enten den kroniske fase af HWS, eller kan have to udviklingstendenser: til dens stigning eller reduktion.

Efter færdiggørelsen udføres kontrol PCR efter 6 måneder.

Omkostninger ved PCR-diagnostik

Følgende symptomer skal være bekymrende:

  • generel svaghed
  • misfarvning af hud, øje sclera, udledning;
  • kvalme;
  • nedsat appetit
  • smerter i muskler og led
  • tyngde i den rigtige hypokondrium
  • forhøjede blodniveauer af AST og ALT.

I kontakt med inficerede patienter anbefales det også i blodprøven, at hæmodialyse undersøges.

Offentlige klinikker gør en blodprøve til PCR gratis, hvis der henvises fra en smitsomme sygeplejerske eller en hepatolog.

Betaltjenester til PCR-diagnostik leveres i alle større russiske byer. Omkostningerne afhænger af typen af ​​test, tilgængelig udstyr, timing og andre faktorer.

Højkvalitets PCR analyse i Moskva og Skt. Petersborg vil koste fra 600 til 900 rubler. I regionerne - fra 300 til 800 rubler.

Bestemmelsen af ​​hepatitis C viral belastning vil koste 17.000-22.000 rubler. For andre typer infektioner prisen på kvantitativ forskning: 1200-10000 rubler.

Fordele og ulemper ved PCR-metoden

Hvad er fordelene ved polymerasekædereaktionsmetoden over andre diagnostiske metoder?

  1. En bred vifte af applikationer. Ved hjælp af PCR, ved hjælp af standardudstyr, kan du identificere enhver virus.
  2. Nøjagtighed af bestemmelse af patogenet. Ved anvendelse af forskellige kombinationer af enzymer og analyseteknikker opnås en 100% specifikation af undersøgelsen for den angivne infektion.
  3. Høj følsomhed. Metoden gør det muligt at påvise tilstedeværelsen af ​​et virusmolekyle i blodet.
  4. Effektivitet. Kvalitativ analyse er klar om et par timer, kvantitativt - om to dage.
  5. Diagnose af virussen i inkubationsperioden. Under PCR bestemmes patogenet ikke ved tilstedeværelsen af ​​antistoffer, når kroppen har et immunrespons, men inden starten af ​​den patologiske proces, hvilket letter behandling.

Ulemper ved PCR er resultatet af dets fordele:

  • Analysens renhed kræver den højeste grad af renhed, herunder luft i laboratoriet, således at "fremmed" DNA ikke kommer ind i prøven under undersøgelse;
  • høje krav til personale involveret i indsamling og analyse af biomateriale.

PCR-kvantitativ

Kvantitativ PCR er en moderne metode til diagnosticering af forskellige seksuelt overførte sygdomme.

Teknikken betragtes som yderst præcis og anvendes, hvis det er nødvendigt at foretage en diagnose i de tidlige stadier af sygdommen. Samt med dets asymptomatiske kursus.

Hvilken læge bør konsulteres til kvantitativ analyse af PCR? Hvad er forberedelsesreglerne for undersøgelsen, og hvad er dens vigtigste essens?

Egenskaber ved PCR-kvantitativ analyse

Kvantitativ PCR-analyse er en ret kompliceret reaktion. Det blev oprindeligt kun anvendt i molekylærbiologi til videnskabelige formål. Kun i de sidste par år er teknikken blevet brugt til at smitte og nogle genetiske diagnoser.

Essensen af ​​kvantitativ analyse af polymerasekædereaktion virker ret simpel. Under reaktionen registrerer en speciel enhed løbende dataene. På grund af dette er det muligt at præcist estimere antallet af bestemte DNA-partikler i biologisk materiale.

Metoden for kvantitativ PCR har ingen grundlæggende forskelle fra den klassiske undersøgelse af denne type. Patienten donerer et smør eller blod som sædvanligt. Men samtidig udføres selve reaktionen under kontrol af en særlig registrar.

Det vil sige for patienten, at polymerasekædereaktionen for at bestemme antallet af vira eller andre patogene organismer ikke adskiller sig fra den klassiske analyse med hensyn til leveringsegenskaberne. Et træk ved denne undersøgelse er, at selve reaktionen i laboratoriet er afsluttet i forholdsvis tidlige stadier. Dette er nødvendigt for at forhindre udseendet af et stort antal PCR-fragmenter, som kan smøre resultatet.

PCR-kvantitativ: når forskning anbefales

Mange patienter spørger deres læger om, hvornår der kræves en kvantitativ analyse af PCR-udslæt og blod. Det anses ofte fejlagtigt, at denne metodes hovedopgave er at foretage en diagnose i mangel af symptomer. Eller hvis infektionen er samtidig.

Følgelig kan henstillingen til overgivelse af biologisk materiale gives til patienter med følgende klager:

  • vandladningsproblemer, der spænder fra urinretention og slutter med ubehagsklapper under tømning af blæren;
  • Udseendet af enhver ikke-standardladning med en bestemt farve eller lugt;
  • ømhed under samleje
  • Tilstedeværelsen af ​​inflammatoriske reaktioner på huden og synlige slimhinder
  • udseende i blodet eller naturlig udledning af blod, pus osv.

Imidlertid anvendes kvantitativ bestemmelse af PCR hyppigere ikke til diagnose, men anvendes, når diagnosen allerede er kendt.

Hvorfor?

Faktum er, at denne metode er i stand til at give lægen information om, hvor intensivt sygdommen udvikler sig. Om den valgte terapi er effektiv, om patogenerne er resistente over for de anvendte lægemidler. Da disse oplysninger er vigtige for behandlingen, anbefales det at tage denne type analyser regelmæssigt med et interval på hver tredje måned. Kvantitativ PCR for hepatitis C er meget vigtig for diagnosen kronisk infektion.

I dette tilfælde vil lægen være opmærksom på, at alle indikatorer er uden for det normale interval. Undersøgelsen anbefales også at passere inden antiviral terapi er ordineret for at bestemme, hvor høj viral belastning er.

Et kvantitativt PCR-smear på chlamydia og andre infektioner giver en masse vigtige oplysninger. Først og fremmest giver det dig mulighed for at vurdere, hvor høj viral belastningen er på patientens krop. Normalt er jo højere det er, jo værre patientens tilstand og den mere radikale behandling er nødvendig for at normalisere vitale tegn. For at reducere denne indikator vurderes også på, hvor effektiv behandlingen er. Hvis indekset falder, vælges terapien korrekt, og den skal fortsættes. Hvis der er stabilitet eller forbedring, er det værd at genvinde behandlingsregimen.

Evaluering af effektiviteten af ​​behandlingen ved hjælp af en PCR-blodprøve for HIV og hepatitis i dag giver dig mulighed for at vælge antiviral terapi.

Og ikke blindt, som det var før, da de kliniske symptomer på disse sygdomme var svage i de tidlige stadier, men målrettet.

Sådan forberedes en kvantitativ PCR-undersøgelse

Mange patienter spørger deres læger om, hvordan de skal forberede sig på levering af biologisk materiale. Således at de opnåede oplysninger som følge heraf var den mest komplette og pålidelige.

Diagnose ved PCR kræver ikke noget meget komplekst præparat, kravene kan betragtes som standard. For det første doneres blod fra en vene som et biologisk materiale.

Da blodet er taget på tom mave, anbefales det at komme til analysen om morgenen. For ikke at tvinge kroppen til at sulte i en hel dag.

Yderligere anbefalinger er som følger:

  • før proceduren med blodprøveudtagning anbefales det at hvile i 15-20 minutter for at kroppen kan komme sig
  • 12 timer før proceduren anbefales det at begrænse: rygning, alkoholforbrug;
  • 48 timer før indsamling af materiale nægter at have sex
  • 12 timer før undersøgelsen er det bedre at ikke spise fede fødevarer;
  • på anbefaling fra lægen er det også muligt, at nogle medicin skal midlertidigt opgives for at opnå et pålideligt resultat;
  • hvis det antages, at barnet donerer blod, anbefales det at få kogt vand i et interval på flere minutter før proceduren til at fylde blodvolumenet, hvilket er mindre end hos voksne.

Det er vigtigt at vælge den rigtige klinik, hvor analysen vil blive givet. Faktisk giver PCR kun høje diagnostiske resultater, hvis der anvendes gode reagenser.

Og teknologierne med blodtransport til laboratoriet og en række andre tilstande observeres.

PCR-kvantitativ: dekodningsfunktioner

Tolkning af udtværing og blodprøver kan virke simple, men det er slet ikke. For at betro tolkningen af ​​resultaterne har du brug for en kompetent specialist, der forstår sygdommen.

Faktisk takket være teknikken kan du:

  • bestemme præcis, hvad der er fasen af ​​infektionsprocessen
  • finde ud af om behandlingen er effektiv
  • at forstå, om en leverbiopsi er nødvendig for hepatitis.

Alle disse data kan kun vurderes fuldt ud af en læge, baseret på et sæt medicinsk viden om infektionsprocessens træk, patientdata og hans sundhedstilstand.

Viral belastning, som også estimeres under denne diagnostiske metode, anses for høj, hvis antallet af patogenekopier overstiger 10 i 7 grader af kopier. En meget lav belastning er angivet med antallet af kopier svarende til 10 i 3 grader. Der er også mellemliggende værdier, der vurderes af en dermatovenerolog eller infektionssygdomme læge. Analysen gentages gennem hele behandlingen. Ved kroniske infektioner anbefales regelmæssig diagnose til at kontrollere sygdommen.

Kvantitativ vurdering af PCR er en af ​​de effektive og pålidelige metoder, der anvendes i moderne medicinsk praksis.

Hvis du skal bestå en kvantitativ analyse af PCR, skal du kontakte en kompetent venerolog.

Kvantitativ PCR-analyse tager sigte på at bestemme koncentrationen

Polymerasekædereaktion (PCR) er i dag et af de mest effektive diagnostiske metoder.

Det giver de mest nøjagtige og pålidelige resultater.

Materialet i undersøgelsen er:

Ved hjælp af PCR diagnosticeres selv latente infektioner, især seksuelt overførte infektioner.

Essensen af ​​denne analyse er at detektere patogenets genom i det undersøgte materiale ved gentagen syntese af dets DNA molekyler.

Ved hjælp af PCR kan bakterielle, virale, protozoale og svampeinfektioner diagnosticeres.

Den maksimale fejl i denne undersøgelse overstiger ikke 5%.

Desuden kan resultaterne opnås allerede på testdagen.

Der er to typer analyser ved hjælp af PCR:

Den kvalitative metode udføres for at detektere sygdomsfremkaldende middel i biomaterialet.

PCR kvantitativ analyse

Polymerasekædereaktion - en metode til laboratoriediagnose.

PCR-testen er meget anvendelig i medicin.

Dette skyldes den høje nøjagtighed.

Grundlaget for metoden er bestemmelsen af ​​DNA'et af mikroorganismer.

Udfør PCR-diagnostik som regel i laboratoriet.

Når der kræves kvantitativ analyse af PCR-udtværinger og blod

Denne metode anvendes i urologi, gynækologi, venerologi.

Ofte er det nødvendigt for diagnosen.

Ved hjælp af PCR-test kan du registrere sådanne sygdomme som:

  • gonoré
  • syfilis
  • ureaplasmosis
  • klamydia
  • trichomoniasis
  • Humant papillomvirus.

Denne metode anvendes også til fremstilling af donorblod.

Det undgår risikoen for transfusion af inficeret blod.

Kvantitativ analyse af PCR sigter mod at bestemme koncentrationen af ​​patogenet i kroppen, dvs. vurdering af graden af ​​"smitte" hos patienten.

Kvantitativ PCR er en uundværlig metode til laboratoriediagnose af viral hepatitis C.

Med det bestemme indholdet i patientens blod RNA af viruset, udtrykke det i IE (internationale enheder) eller kopier pr. 1 ml.

I tilfælde, hvor hepatitis C allerede er diagnosticeret, udføres kvantitativ analyse af PCR i henhold til følgende skema:

Er det nødvendigt at forberede sig på kvantitativ PCR analyse?

Nej, der er ikke behov for særlig træning i dette tilfælde.

Den eneste betingelse er at afholde sig fra at ryge 30 minutter før donation af blod.

PCR-kvantitativ: hepatitis C

Hepatitis C er en smitsom sygdom, der primært påvirker leveren.

Infektionen trænger gennem blodet.

For at identificere årsagen til denne sygdom anvendes en kvantitativ PCR-test.

Det bestemmer koncentrationen af ​​patogenet i patientens blod.

For at bestemme omfanget af sygdommen, gør RNA hepatitis C kvantitativt.

Oftest udføres PCR af hepatitis C efter påvisning af de tilsvarende antistoffer.

Derefter udføres testen på 4, 12, 24 uger og derefter om året.

Resultaterne af kvantitativ analyse af PCR ved diagnosticering af hepatitis C

At passere det korrekte materiale til analysen af ​​PCR er vigtigt.

Du skal dog kunne dechiffrere resultaterne korrekt.

Hvordan fortolker man resultaterne af kvantitativ analyse af PCR ved diagnosen hepatitis C og bestemmer effektiviteten af ​​behandlingen?

Det er værd at bemærke, at hepatitis C-viruset er ekstremt heterogen, modstandsdygtigt over for det ydre miljø.

Med sin lave koncentration i blodet er det ikke sandsynligt, at overførslen er lodret eller gennem seksuel kontakt.

Infektion og sygdom forekommer oftere hos mennesker med svækket immunforsvar.

Eller samtidig smitsomme sygdomme i urinvejen (HIV, kønsinfektioner).

Venerolog, at passere den kvantitative analyse af PCR

Husk! Dekryptere data bør kun læge.

Det er muligt at få et falsk resultat.

Det afhænger af, hvordan materialet blev transporteret, den arbejdsplads, hvor blodet blev taget til forskning, krænkelse af analyseteknologien.

Derfor skal du være opmærksom på, når du vælger et laboratorium.

Smør PCR-kvantitativ på chlamydia

Inden du tager en PCR-test for denne infektion, bør du vide, hvordan du forbereder dig til analysen.

Advarsel! Kvinder tager ikke materiale under menstruationscyklussen.

En vatpind bør kun tages, hvis visse regler overholdes:

  • Brug ikke vaginale suppositorier før testning.
  • Afvise fra samleje på tidspunktet for analysen
  • To uger før forskningsnotat antibiotika

Smøre i kvinder taget fra vagina.

Mænd gør skrabning fra urinrøret.

Materialet tages med en speciel steril probe, hvorefter den anbringes i et sterilt rør.

Resultatet kan være:

  • Negativ - ingen infektion i biomaterialet;
  • Positive - Chlamydia er til stede i smøret.

Kvantitativ PCR analyse: HPV 21 type

Ved hjælp af denne metode kan du straks bestemme typen af ​​virus.

Denne type HPV er almindelig.

HPV, der er mere end 100 arter.

De fleste af dem påvirker huden, de resterende slimhinder.

Der er arter, der kan forårsage kræft, såsom livmoderhalskræft.

Til analysen af ​​at gøre samlingen af ​​epithelceller fra livmoderhalsen.

Resultaterne kan være som følger:

  • Risiko ikke påvist 0-3 Lg (HPV / 105)
  • Muligheden for udseende af dysplasi 3-5 lg (HPV / 105)
  • Høj sandsynlighed for dysplasi 5 og højere Lg (HPV / 105)

DNA-PCR: detekteret

Resultatet af PCR-analysen er positiv - i patientens biologiske materiale blev DNA-fragmenterne fra mikroorganismen fundet.

Hvis du får dette resultat, skal du starte behandlingen så hurtigt som muligt.

Der er tilfælde, hvor resultatet er positivt, men personen føler sig normal, og der er ingen tegn på sygdommen.

Dette kan betyde, at sygdommen er i dets indledende faser.

I dette tilfælde bør du konsultere en læge og starte behandlingen.

Advarsel! Resultatet af analysen er ikke en diagnose. Behandlingsregimen skal ordineres af en læge.

Om nødvendigt udpeger en specialist at gennemgå gentagne undersøgelser,

Til hvilken læge der skal omdannes til kvantitativ analyse af PCR

For at foretage en kvantitativ PCR analyse skal du kontakte klinikken.

Moderne laboratorieudstyr giver nøjagtig PCR-analyse.

Du kan passere et smør, når du besøger venerologen.

Lægen vil undersøge og tage materialet til forskning.

Efter at have modtaget resultatet, hjælper specialisten dig med at dechiffrere resultatet og foreskrive det nødvendige behandlingsforløb.

Få en omfattende høring af en erfaren venerolog, gennemgå en kvantitativ analyse af PCR, samt et kursus af effektiv terapi, du kan kontakte vores betalte KVD.

Husk at høj kvalitet og rettidig diagnose er nøglen til en vellykket behandling og din chance for genopretning.

Hvordan er kvantitativ
PCR analyse fortæller
Løjtnant Oberst af Lægetjenesten,
Læge Lenkin Sergey G.

Om nødvendigt skal enhver kvantitativ PCR-analyse, herunder hepatitis C, kontakte forfatteren af ​​denne artikel - venerolog, urolog i Moskva med 15 års erfaring.

  • blodet
  • urin
  • prostatajuice
  • sædvæske
  • kvalitative og kvantitative
  • Før starten af ​​hans medicin
  • 1 uge efter start af behandlingen
  • På den 4. uge af behandlingen
  • På den 12. uge - på dette tidspunkt tillader kvantitativ bestemmelse af PCR at evaluere effektiviteten af ​​sygdomsbehandling
  • Ved den 24. behandlingsuge - en afsluttende undersøgelse for at bekræfte inddrivelsen
  • Niveauet af viremia eller viral belastning (viruskoncentration i blodet) på 800.000 IE / ml betragtes som høj.

At få disse resultater betyder den akutte fase af sygdommen eller reaktivering af virussen.

Denne indikator angiver en høj grad af infektivitet, "smitte" hos en person. Den kendsgerning, at faren for at være inficeret med en virus fra ham, er for øjeblikket meget høj.

  • Indikatoren 400 000 IE / ml indikerer et lavt virusindhold.

Dette kan observeres med en høj grad af kropsbestandighed.

Som følge heraf undertrykkes reproduktionen og aktiviteten af ​​virusen. Eller når man tager sig af, takket være effektiv terapi.

I nogle tilfælde viser analyseresultaterne indikatoren "under måleområdet."

Dette betyder, at koncentrationen af ​​viruset i blodet er ubetydelig.

Men alligevel er viruset til stede i kroppen, hvilket bekræfter PCR af høj kvalitet.

En indtastning i formularen "Ikke detekteret" analyseresultat indikerer, at der ikke er virus i patientens blod.

Forrige Artikel

OV Oshmarina