Den antiproliferative virkning er

Mad

Når en infektion forekommer i menneskekroppen, udvikles immunreaktioner med komplekse cellulære interaktioner. Regulatorer af disse interaktioner er specielle proteinmolekyler - cytokiner. Til dato er mere end 200 forskellige signalmolekyler blevet undersøgt. Deres egenart er, at de selv ikke kan have nogen virkning på fremmede antigener og udelukkende tjener til at overføre information fra en celle til en anden. Uden deltagelse af cytokiner er udviklingen af ​​et normalt immunrespons umuligt. Et af de centrale cytokiner er interferon.

Der er tre typer interferon: interferon-alpha (INF-a), interferon-betta (INF-β), interferon-gamma (INF-γ). Alle interferoner har antivirale, immunmodulerende, antitumor- og antiproliferative virkninger. Ud over de generelle egenskaber har interferoner en række forskelle.

INF-α og INF-β ligner mere hinanden. Deres gener ligger på kromosom 9. At generere begge inducerende signaler er vira. De har en udtalt antiviral og antitumor effekt, i meget mindre grad udviser immunmodulerende egenskaber. Hovedcellerne, der producerer for INF-a, er makrofager, for INF-p-epitheliumceller, fibroblaster.

INF-γ har en udtalt immunmodulerende effekt sammen med interleukin-2 (IL-2) og tumornekrosefaktor (TNF eller TNF) er det vigtigste proinflammatoriske cytokin, er en inducer af den cellulære forbindelse af immunitet. Antivirale og antitumoregenskaber er mindre udtalte end de af INF-α og INF-β. Gen INF-y er placeret i kromosom 12, hvor de vigtigste celler producerer er T-lymfocytter, naturlige eller naturlige dræberceller (NK-celler). Det induktive signal til produktion kan være hvilket som helst antigen eller andre cytokiner.

Den antivirale virkning af interferoner er at undertrykke syntese af viralt RNA, undertrykke syntesen af ​​virale kappeproteiner. Mekanismen af ​​denne virkning er aktiveringen af ​​intracellulære enzymer, såsom for eksempel proteinkinase eller adenylatsyntetase. Proteinkinase ødelægger initieringsfaktoren for proteinsyntese med messenger RNA, som inhiberer proteinsyntese. Adenylatsyntetase - forårsager syntese af stoffer, der ødelægger viralt RNA.

Den immunmodulerende virkning af interferoner er evnen til at regulere interaktionen mellem celler involveret i immunresponset. Interferoner vil udføre denne funktion ved at regulere cellernes følsomhed over for cytokiner og ekspressionen på cellemembraner af molekyler i hovedhistokompatibilitetskomplekset af type I (GCG1). Forøgelse af ekspressionen af ​​GKG1 på virusinficerede celler øger sandsynligheden for, at de vil blive genkendt af immunokompetente celler og elelenii fra kroppen. INF-y har de mest udtalte immunmodulerende egenskaber. Som et produkt af type I T-lymfocytter aktiverer det sammen med andre proinflammatoriske cytokiner makrofager, T-cytotoksiske lymfocytter, naturlige killere (NK-celler), hæmmer aktiviteten af ​​B-lymfocytter, aktiverer prostaglandin og kortikosteroidsystemer. Alle disse faktorer forøger phagocytiske og cytotoksiske reaktioner inden for det inflammatoriske fokus og bidrager til effektiv eliminering af det smitsomme middel.

Antitumorvirkningen af ​​interferoner er forbundet med deres evne til at bremse eller hæmme væksten af ​​cellekultur og aktivere immunsystemets antitumormekanismer. Denne egenskab af interferon er blevet opdaget for længe siden og anvendes meget til terapeutiske formål. Alle antitumorvirkningerne af interferon er opdelt i direkte og indirekte. Direkte er forbundet med evnen til at have en direkte effekt på tumorcellerne, deres vækst og differentiering. Indirekte er forbundet med at forbedre immunokompetente cellers evne til at detektere og ødelægge atypiske celler i kroppen.

Direkte antitumorvirkninger af interferon:

  • Inhibering af RNA-syntese.
  • Suppression af proteinsyntese.
  • Stimulering af udifferentierede celler til modning.
  • Øget ekspression af tumorcellemembranantigener og hormonreceptorer.
  • Overtrædelse af fartøjets dannelse.
  • Neutralisering af onkovirus.
  • Suppression af tumorvækstfaktorer.

Indirekte antitumorvirkninger af interferon:

  • Stimulering af aktiviteten af ​​celler i immunsystemet (makrofager, NK-celler, T-cytotoksiske lymfocytter).
  • Forøgelse af ekspression på cellerne af histokompatibilitetsklasse I-molekyler.

Den antiproliferative virkning af interferoner ligger i interferonernes evne til at udvise cytostatiske egenskaber - at inhibere cellevækst ved at undertrykke RNA og proteinsyntese såvel som inhibering af vækstfaktorerne, som stimulerer celleproliferation.

Glukokortikoider (antiproliferativ virkning)

Den antiproliferative virkning af glucocorticoider er forbundet med begrænsningen af ​​monocyteksponering for det inflammatoriske fokus og inhiberingen af ​​fordelingen af ​​fibroblaster både af hormonerne selv og et fald i stimulerende virkning på dem af histamin, serotonin og kininer, hvis dannelse formindskes af disse steroider.

Derudover undertrykker glucocorticoider syntesen af ​​mucopolysaccharider og derved begrænser bindingen af ​​vand- og plasmaproteiner med væv, som sammen med exudatet er bundet til fokus for revmatisk inflammation. Som følge heraf reduceres hævelsen og vigtigst udviklingen af ​​fibrinoidfasen af ​​revmatisk inflammation og derefter hyalinose.

Som følge heraf forhindres eller reduceres væsentlige krænkelser i strukturen af ​​hjertets ventiler, myokardium, blodkar osv. Den mest gode effekt udvikler sig ved anvendelse af glucocorticoider sammen med ikke-steroide antiinflammatoriske lægemidler.

Glucocorticoider bruges også til at kompensere for deres mangel i kroppen og for regulatorisk indvirkning på svækkede funktioner.

For at rette op på manglen glucocorticoidhormoner når det anvendes som primær adrenal insufficiens (Addisons sygdom, blødning i binyrebarken ved sepsis, fødsel skade, hypoxi), kendetegnet insufficiens og gluco og mineralkortikoider og ved sekundær adrenal insufficiens (hypopituitarisme, hypothalamus hæmning systemet - hypofyse - adrenal cortex på grund af langvarig brug af glucocorticoider), der kun er karakteriseret ved mangel på glucocorticoider.

"Pædiatrisk Farmakologi", I.V. Markova

Prescribing af kortikosteroider hver anden dag kan forhindre eller reducere inhiberingen af ​​hypothalamus-hypofysen ----------------- systemet i binyrerne og undertrykkelse af uspecifik resistens mod infektion. J. Melby (1977) opregnede de indikationer, for hvilke glucocorticoid i de fleste patienter kan ordineres hver anden dag såvel som sygdomme, som det ikke er muligt for. Du kan bruge glukokortikoider hver anden dag til følgende sygdomme: bronchial...

Ved ordination af kortikosteroider i tilfælde, hvor der ikke kræves akut behandling, anbefales det at tage hensyn til den daglige rytme af udskillelse af endogene hormoner i binyrebarken. Ved behandlingens begyndelse skal de fleste (normalt 2/3) doser ordineres om morgenen, 7 til 8 timer, resten - om eftermiddagen 13 til 14 timer. Når man deler den daglige dosis i tre doser, administreres de til 7, 10...

Den naturlige mineralocorticoid - aldosteron - produceres af den glomerulære zone af binyrens cortex; Denne proces reguleres af angiotensin II, som dannes under indflydelse af renin. Deoxycorticosteronacetat (DOXA) og DOX-trimethylacetat anvendes som lægemidler. Indikationer for brug. Mineralocorticoider anvendes til intestinal toxicose i kombination med infusionsterapi. De bruges også i akut hypotension i forbindelse med tabet af natrium og vand (men...

Indikationer for langvarig administration af høje doser glucocorticoider. De anvendes i flere uger og endda måneder til behandling af autoimmun hæmolytisk anæmi, trombocytopenisk purpura, noget nefritis, ulcerativ colitis, sarcoidose, akut leukæmi, generaliseret Hodgkins sygdom, ikke-reumatisk carditis, undertiden med alvorlig bronchial astma. I de fleste tilfælde afhænger den terapeutiske virkning her på undertrykkelsen af ​​cytolysereaktioner, især af allergisk genese.

Anabolske steroider: methandrostenolon (Dianabol, nerobol), methylandrostediol (methandriol), phenobolin (durabolin, nerobolil), retabolil - stoffer opnået ved syntese fra mandlige kønshormoner (androgener). Androgener har to forskellige virkninger: androgen (dvs. stimulerer udviklingen af ​​sekundære seksuelle egenskaber) og anabolske. Anabolske steroider adskiller sig fra androgener i struktur, og deres androgeniske egenskaber reduceres kraftigt (100 gange eller mere).

Antiproliferative lægemidler - Liste over stoffer og medicin

Beskrivelse af den farmakologiske virkning

Antiproliferativ virkning sigter mod at undertrykke den overdrevne proliferation af forskellige celler. Virkningsmekanismen er anderledes og afhænger af det specifikke lægemiddel og typen af ​​celler, som denne handling er rettet mod. Mekanismen for denne handling kan især være forbundet med tilvejebringelsen af ​​en modulerende virkning på syntese af visse onkogener, hvilket fører til normalisering af neoplastisk celle-transformation og inhibering af tumorvækst. Eller virkningsmekanismen kan være baseret på inhibering af fibroblastproliferation stimuleret af hovedfaktoren for fibroblastvækst. Narkotika med antiproliferative virkninger anvendes til behandling og forebyggelse af forskellige onkologiske sygdomme, prostata adenom og forskellige kroniske hudsygdomme (for eksempel psoriasis).

Drug søgning

Forberedelser med farmakologisk virkning "antiproliferativ"

  • En
  • Avonex (lyofilisat til fremstilling af opløsning til injektionsvæsker)
  • Avonex (opløsning til intramuskulær administration)
  • Adenostop (koncentreret til fremstilling af oral opløsning)
  • Altevir (injektionsvæske, opløsning)
  • Alfaferon (injektionsvæske, opløsning)
  • Arava (oral tabletter)
  • B
  • Beloderm (creme til ekstern brug)
  • Beloderm (Salve til ekstern brug)
  • D
  • Genferon (Rectal Suppositories)
  • Genferon Light (Spray nasal)
  • D
  • Dilatrend (oral tabletter)
  • L
  • Leflunomid (Pulverstof)
  • Leflunomid (orale tabletter)
  • P
  • Permixon (kapsel)
  • P
  • Realdiron (lyofilisat til fremstilling af opløsningen til subkutan administration)
  • Ronbetal (opløsning til subkutan administration)
  • T
  • Tadenan (kapsel)
  • Tykveol (Olie til oral administration)
  • Tykveol (Rectal Suppositories)
  • Tykveol (kapsel)

Advarsel! Oplysningerne i denne medicineringsvejledning er beregnet til læger og bør ikke danne grundlag for selvbehandling. Beskrivelser af stoffer er givet til fortrolighed og er ikke beregnet til udnævnelse af behandling uden deltagelse af en læge. Der er kontraindikationer. Patienterne har brug for ekspertrådgivning!

Hvis du er interesseret i andre antiproliferative midler og præparater, deres beskrivelser og brugsvejledninger, synonymer og analoger, oplysninger om sammensætning og form for frigivelse, indikationer for brug og bivirkninger, anvendelsesmåder, doseringer og kontraindikationer, noter om børns medicinering, nyfødte og gravide kvinder, pris og anmeldelser af medicin eller du har andre spørgsmål og forslag - skriv til os, vi vil helt sikkert forsøge at hjælpe dig.

antiproliferativ

Antiproliferativ virkning sigter mod at undertrykke den overdrevne proliferation af forskellige celler.

Virkningsmekanismen er anderledes og afhænger af det specifikke lægemiddel og typen af ​​celler, som denne handling er rettet mod. Mekanismen for denne handling kan især være forbundet med tilvejebringelsen af ​​en modulerende virkning på syntese af visse onkogener, hvilket fører til normalisering af neoplastisk celle-transformation og inhibering af tumorvækst. Eller virkningsmekanismen kan være baseret på inhibering af fibroblastproliferation stimuleret af hovedfaktoren for fibroblastvækst.

Narkotika med antiproliferative virkninger anvendes til behandling og forebyggelse af forskellige onkologiske sygdomme, prostata adenom og forskellige kroniske hudsygdomme (for eksempel psoriasis).

Antiproliferativt middel

Opfindelsen angår den farmaceutiske industri, især med midlerne fra naturlig oprindelse, med antiproliferativ aktivitet. Midlet med antiproliferativ aktivitet er et Toxocara canis proteinekstrakt, opnået ved ekstraktion af en helminth homogenat T. Canis phosphat-saltvand bufferopløsning med en pH på 7,2 i forholdet 1:10 i 36-48 timer ved 4 ° C, centrifugering. Ovenstående værktøj har en udtalt antiproliferativ aktivitet. 1 hk f-ly, 1 fane, 2 ex.

Opfindelsen angår medicin og veterinærmedicin, især et nyt middel med naturlig oprindelse, som har en antiproliferativ virkning.

Moderne medicin har et ret omfattende arsenal af lægemidler til kemoterapi af tumorer. De fleste kemoterapeutiske midler er repræsenteret af grupper af alkylerende antineoplastiske lægemidler, antimetabolitter, antitumorantibiotika, antitumorhormonale lægemidler, immunomodulatorer og nogle andre med en anden virkningsmekanisme. De fleste af disse kræftmidler er meget giftige, og derfor vælges ordningen og varigheden af ​​kemoterapi under hensyntagen til manifestationerne af bivirkninger, som påvirker effektiviteten af ​​behandlingen generelt.

Naturlige antitumorlægemidler af vegetabilsk oprindelse er kendt (Vinca roseal alkaloider (vinblastin, vincristin); Trækalkaloider (taxaner) (paclitaxel, docetaxel); )) og bakteriel oprindelse (rubromycin og andre), som har begrænset anvendelse også på grund af den høje toksicitet og smalle terapeutiske spektrum af handling (behandling af nogle typer af s tumor, fortrinsvis med exofytisk vækst).

Derfor er der et behov for nye, stærkt effektive anticancerlægemidler af naturlig oprindelse, som ville have et bredt spektrum af handlinger og ville være mindre giftige.

Helminths - det fælles navn for parasitære orme, der lever i mennesker, andre dyr og planter, der forårsager helminthinfektioner.

Helminths omfatter repræsentanter for bændelorm, eller cestodes, flukes eller trematodes (begge disse grupper tilhører flatworms) og rundorm eller nematoder.

Sidstnævnte omfatter toxokarer (især Toxocara canis). T. canis er en nematode parasitisk i tarmen af ​​kødædende, såsom hunde; invasiv sygdom kendt som toxocariasis.

Under parasitisme producerer helminther og frigiver forskellige metaboliske produkter. Sekretoriske udskillelsesprodukter fra helminths er unaturlige stoffer til værtsorganismen i dens fysiologiske processer.

Det er kendt, at patogener af invasioner kan have en modulerende effekt på mange sygdomme i den mest varierede ætiologi, herunder ondartede (for eksempel Vasilev S. et al. (2015). Der er især rapporter om, at infektion med nematoder Trichinella spiralis ( reproduktion af trichinose) fører til undertrykkelse af væksten af ​​maligne celler og forøgelse af dyrs overlevelse efter inokulering af B-16 melanomceller in vivo (Molinari JA, Ebersole JL, 1977; Pocock D., Meerovitch E., 1982; Kang YL et al., 2013 ). Der findes også data om T. Spira stofskifteprodukter lis med en inhiberende virkning på tumorcellernes vækst og overlevelse in vitro (Vasilev S. et al., 2015; Wang X. L. et al., 2009; Wang X. L. et al., 2013).

Undersøgelser til vurdering af antitumoraktiviteten af ​​T. canis eller de metaboliske produkter af disse helminter er ikke tidligere blevet udført.

Formålet med opfindelsen er at opnå proteinekstrakter fra væv T. canis, evaluering af deres antiproliferative virkninger på modeller af tumorceller af forskellige linjer og at sikre deres mulige anvendelse i fremtiden som et effektivt antitumormiddel.

Essensen af ​​opfindelsen ligger i det faktum, at midlet med antiproliferativ aktivitet er et proteinekstrakt af helminther, især Toxocara canis ekstrakt. Det skal bemærkes, at betingelserne for opnåelse af et ekstrakt fra helminthomogenatet, herunder T. canis, afhænger af det anvendte biologiske materiale, og de væsentlige træk ved opnåelse af proteinekstrakter er ekstraktion med phosphat-saltvandsbuffer med pH = 7,2.

Ekstraktet har en udtalt antiproliferativ og cytostatisk virkning på modeller af humane tumorceller in vitro. Som nævnt ovenfor er toxocarekstraktet ikke tidligere blevet testet på modeller af humane tumorceller in vitro.

På grund af den naturlige oprindelse af det foreslåede antiproliferative middel kan være mindre toksisk i nærvær af høj antitumorvirkning af et bredt spektrum af virkninger.

Eksempler på specifikke præstationer

Eksempel 1. Fremstilling af proteinekstrakt T. canis.

Som et middel, formodentlig med antiproliferativ aktivitet, anvendte proteinekstrakt fra modent T. canis, forrenset fra forbindelser med lav molekylvægt.

Vasket grundigt med destilleret vand, derefter med en fysiologisk opløsning blev friske frosne, seksuelt modne orme - Toxocara canis udsat for saksslibning, homogenisering i en porcelænmørtel anbragt i en skål med is. Under homogeniseringsprocessen blev det resulterende biomateriale udsat for flere frysninger og optøning (3-5 gange) med samtidig slibning for fuldstændigt at ødelægge råmaterialets struktur for at opnå en homogen homogen masse. Som et ekstraktionsmiddel af proteiner fra det opnåede homogenat af T. canis blev phosphat-saltopløsningsbufferopløsning pH 7,2 anvendt, som blev fremstillet ifølge opskriften (natriumchlorid, 8,5 g, disubstitueret natriumphosphat, 1,15 g, monophosphorsyrekalium, O, 2 g i 1 liter destilleret vand) i forholdet 1:10. Ekstraktion blev udført under kølede betingelser ved + 4 ° C i 48 timer med konstant omrøring på en magnetisk omrører. Efter ekstraktionstidspunktet blev det resulterende biomateriale centrifugeret ved 15.000 omdr./min. I 20 minutter i en Optima TLX-kølet centrifuge (bænk-topcentrifuge styret af en mikroprocessor Becman Coulter Herneshal, S.A.). Proteinekstraktet fra T. canis opnået efter centrifugering blev befriet fra lavmolekylære proteiner ved dialyse mod phosphat-saltvand bufferopløsning fortyndet med destilleret vand i et forhold på 1:10.

Det opnåede proteinekstrakt blev opbevaret ved -20 ° C. Ved anvendelse af polyacrylamidgelelektroforese blev det bestemt, at proteinekstrakten fra T. canis indeholder mere end 20 proteinfraktioner med forskellig elektroforetisk mobilitet og molekylvægt.

Eksempel 2. Evaluering af virkningen af ​​T. canis-proteinekstrakten på kulturer af humane brystcancerceller (MCF-7) og humant colon (Caco-2) afhængigt af koncentrationen af ​​ekstraktet.

Formålet med dette forsøg var at vurdere effekten af ​​proteinekstraktet T. canis på proliferationen af ​​humane tumorceller af to linjer.

Materialer og metoder

Målceller. To epithelialcellelinjer blev anvendt i dette værk: MCF-7 (humant brystadenocarcinom) og Caco-2 (humant colon-adenocarcinom). Cellerne uden for eksperimentet blev opbevaret i flydende nitrogen. Inden studierne blev optøet, blev ampullerne med celler optøet og dyrket ved standardmetoder i kulturflasker (CORNING, Flask, 25 cm 2, USA) i DMEM GlutaMAX vækstmedium (Gibco) med tilsætning af 10% FBS og antibiotikum / antimykotisk (Gibco, × 100) høj luftfugtighed betingelser2-inkubator (New Brunswick, Galaxy 170R) ved T = 37 ° C i en atmosfære på 5% CO2.

Det undersøgte proteinekstrakt. Det undersøgte proteinekstrakt T. canis (til fremstilling, se eksempel 1) er et ekstrakt i phosphatpufret saltvand, ikke sterilt. Proteinkoncentrationen i stamopløsningen var 10,9 mg / ml. Før forskning blev opløsningen opbevaret ved -70 ° C.

Før operation blev røret med proteinekstrakten optøet ved stuetemperatur. I et in vitro-forsøg blev proteinekstrakten testet ved følgende proteinkoncentrationer: 12,5, 25, 50, 100, 250, 500, 1 og 2 mg / ml. Til fremstilling af fortyndinger blev DMEM GlutaMAX vækstmedium (DGIBCO) med 2% FBS og antibiotika anvendt.

Før forsøget blev fremstillet en arbejdsopløsning med en koncentration på 2 mg / ml, efter sterilisering gennem et Millipore mappe-dyse (0,22 μ) blev fremstillet ved fortynding af ekstraktet af T. canis: 1, 500, 250, 100, 50, 25 og 12,5 μg / ml ved anvendelse af vækstmedium DMEM GlutaMAX (DGIBCO) med 2% FBS og antibiotikum.

Til eksperimentet blev MCF-7 og Caco-2-celler inkuberet i overensstemmelse med standardproceduren for at opnå et underkonfluent monolag. I det aktive vækststadium blev cellemonolaget dispergeret med en trypsin / versaenopløsning, de resulterende celler blev resuspenderet i DMEM GlutaMAX vækstmedium (Gibco) med 10% FBS og et standardkoncentrationsantibiotikum. Frisklavet celle suspension blev sådd i plader med 24 brønde (SARSTEDT, Tyskland) ved 35 x 10 3 celler pr. Brønd for MCF-7 celler og ved 30 x 10 3 celler pr. Brønd for Caco-2-celler. Derefter blev pladerne anbragt i CO2-inkubator i 3 timer, indtil cellerne sprøjtede. Derefter blev medium med ikke-adhærente celler fjernet fra brøndene, og vækstmedium blev tilsat til forsøgsbrøndene med testkoncentrationer af stoffet (i 4 gentagelser for hver testkoncentration). Som kontrol blev fire brønde efterladt med celler, som blev dyrket i et komplet vækstmedium med 2% FBS uden teststoffet. Det endelige volumen af ​​vækstmedium i kontrol- og eksperimentelle grupper på 500 μl pr. Brønd.

Under eksperimentet blev daglig lysoptisk observation af cellerne udført ved anvendelse af et omvendt Olympus CK 40-mikroskop (Japan), hvorved der blev vurderet tilstedeværelsen eller fraværet af ændringer i cellemorfologi i de eksperimentelle brønde sammenlignet med kontrollen. Den proliferative respons af tumorceller til virkningen af ​​det undersøgte ekstrakt af T. canis blev evalueret ved densiteten og levedygtigheden af ​​det dannede monolag efter 96 timers inkubation af cellerne i nærværelse af det undersøgte ekstrakt.

Celle-levedygtighed blev bestemt under anvendelse af standardcelle-tællingsproceduren i Goryaev-kammeret med foreløbig farvning af cellesuspensionen med trypanblåt opløsning. Til dette formål blev monolaget dispergeret med en trypsin / verssenopløsning, cellerne blev resuspenderet i vækstmediet, og den fremstillede cellesuspension blev farvet med 0,4% Trypan Blue-opløsning (SIGMA). Herefter tælles cellerne i Goryaev-kammeret. For at gøre dette blev det samlede (samlede) antal celler og antallet af farvede (ikke-levedygtige) celler talt i hver brønd.

% levedygtige celler (Ngodt) beregnet ved formlen

hvor nt - totalt (totalt) antal celler i brønden

Ncirka - antallet af farvede (ikke-levedygtige) celler i brønden.

Virkningen af ​​det undersøgte ekstrakt af T. canis på den proliferative aktivitet af tumorceller MCF-7 og Caco-2 blev evalueret efter 96 timer ved sammenligning af det totale antal celler i forsøgsbrøndene i forhold til kontrollen.

Under eksperimentet evaluering af effekten af ​​testen ekstrakt af T. canis ved koncentrationer angivet på epiteliale kulturer af humane brysttumorceller (MCF-7) og human colon (Caco-2) blev udført daglig visuel kontrol med karakteren af ​​væksten og morfologien af ​​de voksende kolonier af celler. Efter 24 og 48 timer i alle forsøgsbrønde med MCF-7 og Caco-2-celler er tyngden af ​​kolonier sammenlignelig med kontrollen. Der blev ikke fundet morfologiske ændringer. Detritus var fuldstændig fraværende.

Efter 72 timer blev en signifikant vækstforsinkelse observeret i MCF-7 og Caco-2-celler i en koncentration på 2 mg / ml. Det blev bemærket, at koloniernes størrelse i de eksperimentelle brønde ved 2 mg / ml var mindre end i kontrolgruppen; Også i synsfeltet er antallet af mitotiske delende celler markant faldet, og der er ikke registreret nogen morfologiske ændringer. I brøndene i MCF-7 og Caco-2-celler ved 1 og 500 μg / ml blev der observeret en lille vækstlag sammenlignet med kontrollen. I de eksperimentelle brønde med en koncentration på 12,5, 25, 50 og 250 μg / ml blev der ikke fundet nogen forskel i sammenligning med kontrolgruppen K.

Efter 96 h dyrkning i MCF-7 og Caco-2-celler i koncentrationer på 2, 1 og 500 μg / ml blev der observeret signifikant færre proliferative kolonier i synsfeltet med et mindre antal celler sammenlignet med kontrolgruppen. Morfologiske ændringer blev kun registreret i MCF-7-celler med en maksimal koncentration på 2 mg / ml. I denne eksperimentelle gruppe blev der set individuelle kolonier, hvor celler uden klare og udtalte konturer med et tab af karakteristisk mønster blev observeret. Antallet af mitotiske opdelte celler i synsfeltet er reduceret. I dette tilfælde var detritus i miljøet fraværende.

Efter forsøget blev afsluttet, efter 96 timer blev cellerne trypsiniseret, den resulterende cellesuspension blev farvet med en 0,4% trypanblåt opløsning, og antallet af celler blev talt i et Goryaev-kammer. Resultaterne af tællende celler er præsenteret i tabel 1.

Ud fra dataene fremlagt i tabel 1 følger det, at det undersøgte ekstrakt af T. canis ikke signifikant påvirker antallet af levedygtige Caco-2-celler efter 96 timers inkubation. I koncentrationer på 2, 1 og 500 μg / ml var antallet af levedygtige celler i den humane tyktarm således 90,0, 88,5 og 88%, hvilket er sammenligneligt med kontrolgruppen af ​​celler, hvor levedygtigheden er 96%. På samme tidspunkt blev der ved de samme koncentrationsværdier observeret et signifikant fald i det totale antal celler i sammenligning med kontrolgruppen. Således var det samlede antal Caco-2-celler i kontrolgruppen efter 96 timers dyrkning 116,7 x 10 3 celler / brønd, og ved 500, 1 og 2 mg / ml var 72,0 × 10 3, 63,3 × 10 3 og 65,9 × 10 3 celler / brønd, henholdsvis. Ved ekstraktkoncentrationer fra 12,5 til 250 μg / ml er det totale antal celler sammenligneligt med kontrolgruppen og varierede fra 94,0 × 10 3 til 106,0 × 10 3 celler / brønd. På baggrund heraf kan det konkluderes, at høje koncentrationer af T. canis ekstrakt fra 500 til 2 mg / ml hæmmer proliferativ aktivitet af Caco-2 tumorcellerne.

Når man sammenligner de opnåede resultater (tabel 1) om virkningen af ​​T. canis-ekstrakt på dyrkningen af ​​humane bryst- og humane tykktarmsceller, kan det antages, at MCF-7-celler er mere følsomme over for teststofets negative virkning. Det følger således af dataene i tabel 1, at antallet af levedygtige MCF-7-celler gradvist faldt fra 95,2% med en mindste dosis på 12,5 til 79,5% med en maksimalværdi på 2 mg / ml sammenlignet med en kontrolværdi på 96,8 %. En svag hæmmer af testekstrakt på den proliferative aktivitet af MCF-7-celler blev manifesteret allerede ved en koncentration på 50 ug / ml, hvor det totale antal celler udgjorde 151,9 x 10 marts celler / brønd, i sammenligning med en referenceværdi 181,3 × marts 10 celler / hullet. Med en stigning i koncentrationen fra 100 μg / ml og højere øgedes hæmmende virkning af ekstraktet proportionalt til koncentrationen og nåede maksimale værdier ved 2 mg / ml, hvor det totale antal celler faldt tre gange sammenlignet med kontrollen og var 60,0 × 10 3 celler / brønd.

Baseret på resultaterne opnået i dette arbejde kan vi konkludere følgende.

1. Det undersøgte ekstrakt af T. canis har en udtalt antiproliferativ virkning på MCF-7-celler i koncentrationer på 100, 250, 500, 1 og 2 mg / ml, hvilket manifesterer sig ved 96 h inkubation.

2. Effekten af ​​ekstraktet på MCF-7-celler er dosisafhængig.

3. Den inhiberende virkning af ekstrakten af ​​T. canis på den proliferative aktivitet af kulturen af ​​Caco-2-celler manifesteres i mindre grad og i højere koncentrationer på 500, 1 og 2 mg / ml.

4. Kulturen af ​​MCF-7-celler er mere følsom over for den antiproliferative virkning af ekstraktet af T. canis sammenlignet med Caco-2-celler i en in vitro model efter 96 timers kultur.

1. Kang Y.J., Jo Jo, Cho M.K. et al. Af Thrichinella spiralis infektion af B16-F10 melanomceller // Vet. Parasitol. - 2013. - V. 196 (1-2). - s. 106-113.

2. Molinari, J.A., Ebersole, J.L. Antineoplastiske virkninger af langvarig Trichinella spiralis infektion på B-16 melanom // Int. Arch. Allergi Appl. Immunol. - 1977. - V. 55 (1-4). S. 444-448.

3. Pocock D., Meerovitch E. Den anti-neoplastiske virkning af trichinelosen i syngenisk murin model // Parasitologi. - 1982. - V. 84 (punkt 3). - s. 463-473.

4. Vasilev S., Ilic N., Gruden-Movsesijan A. et al. Nekrose og apoptose i trichinella spiralis-medieret tumorreduktion // Cent. Eur. J. Immunology. - 2015. - V. 40 (1). - s. 42-53.

5. Wang X.L., Fu B.Q., Yang S.J. et al. Trichinella spiralis et potentielt antitumor middel // Vet. Parasitol. - 2009. - V. 159 (3-4). - s. 249-252.

6. Wang X.L., Liu M.Y., Sun S.M. et al. Et antitumorprotein produceret af Trichinella spiralis inducerer apoptose i humane hepatom H7402 celler // Vet. Parasitol. - 2013. - V. 194 (2-4). - s. 186-188.

1. agent, har antiproliferativ aktivitet, som er et protein ekstrakt Toxocara canis ved ekstraktion gomogentata helminter T. Canis phosphatbufret saltvand ved pH 7,2 i et forhold på 1:10 i 36-48 timer ved 4 ° C, og centrifugering.

2. Værktøj ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det har antiproliferativ aktivitet på modeller af humane tumorceller in vitro.

Den antiproliferative virkning er

Nogle funktioner ligger til grund for interferons antiproliferative virkning. De fleste af komponenterne i interferons anti-infektive aktivitet spiller en rolle i deres antitumor effekt.

Citeret forøget syntese Mx-proteiner, er inhibitorer af mRNA transskription enzymer 2'-5'-oligoadenylatsyntetase system inhibere translation påkrævet til syntesen af ​​cellulære proteiner, tryptophan udtømning af intracellulære depoter, hvilket fører til afbrydelse af proteinsyntese i en celle, er af stor betydning i den antiproliferative, herunder antitumor, interferon virkning.

Signifikansniveau ændrer 2'-5 'syntetase antiproliferative virkning af IFN-a validerede kliniske observationer: viser korrelationen grad med stigende enzym terapi er effektiv hos patienter med intestinal carcinoid og lymfomer.

Ikke mindre signifikant i interferonets antiproliferative virkning er en anden mekanisme. Signalet transmitteret til cellekernen ved binding af interferon til interferonreceptoren reducerer ekspression af proto-onkogener, især c-tus og c-fos, involveret i reguleringen af ​​cellevækst.

Suppression af aktiviteten af ​​disse proto-onkogener fører til blokade af cellecyklusen, akkumulering af celler i G0-fasen, med det resultat at proliferationen sænker eller stopper, da de fleste celler gennemgår apoptose. Denne proces er reversibel, og nogle gange efter fjernelse af interferon kan celleproliferation genvinde i samme hastighed, mens ekspressionen af ​​onkogener, der undertrykkes i nærværelse af interferon, efter dens fjernelse fra kroppen også kan komme sig på samme niveau.

På lignende måde forårsager interferonernes virkning i de fleste tilfælde ikke irreversible processer i celler, hvis genotype ændres under indflydelse af integrationen af ​​virusgenomet i cellens DNA. Langvarig anvendelse af interferon i disse tilfælde kan genoprette den normale cellefænotype, men ophør af interferonvirkning fører igen til udvikling af en tumor.

Inhibering af angiogenese, vaskulær vækst og neoplasma, som spiller en vigtig rolle i tumorvækst og metastase, er vigtig i antiproliferativ, især antitumor, virkning af interferoner. Talrige undersøgelser undersøger terapeutiske virkningsmekanisme af IFN-a ved haemangiomatosis viste, at interferoner inhiberer proliferation af endotelceller og glatte muskelceller, inhibere fibroblastvækstfaktor og angiogenin (vækstfaktor og vaskulære neoplasmer), reducere produktionen af ​​kollagen.

Det blev påvist, at IL-12, som har en udtalt anti-angiogen virkning, forbedrer dannelsen af ​​IFN-y og dens effektorprotein p10.

På cellekulturer af raske donorer og patienter med akut leukæmi er det blevet påvist, at IFN-a signifikant hæmmer telomeraseaktiviteten, hvilket enzym regulerer længden af ​​telomerer, der er nødvendige for celledeling. Der er gentagne gange bekræftet dokumentation for, at IFN-y øger ekspressionen af ​​FAS antigenet og caspase 3 og derved inducerer apoptose hos benmarg (CD34 +) progenitorer.

Der er tegn på, at IFN-a virker på en lignende måde, og virkningen af ​​dens apoptotiske virkning forøges ved fragmenteringen af ​​det anti-apoptotiske Bax-molekyle forårsaget af det. IFN-a forbedrer også frigivelsen i blodet af tumornekrosefaktoren, som er rettet mod nedbrydning af tumorceller.

På baggrund af de foreliggende data er det således indlysende, at interferoner har antiproliferative midler, herunder antitumor, virkning, implementeret på flere, ofte indbyrdes forbundne måder. I antitumor-effekten af ​​interferoner er både de beskrevne metoder til direkte virkninger på tumor- og indirekte antitumormekanismer associeret med en forøgelse i aktiviteten af ​​makrofager, aktivering af T-celler, naturlige killere og en stigning i antistofproduktion vigtige.

Den antiproliferative virkning er

Institut for Epidemiologi og Mikrobiologi. NF Gamalei RAMS, Moskva

Antiproliferativ virkning

Meget følsom overfor AP-effekten af ​​tumorceller, der er kendetegnet ved kontinuerlig ukontrolleret vækst, gav AP-effekten håb for antitumoraktiviteten af ​​IFN. Mange hundreder af forskere, der er involveret i studiet af dette problem, kombinerer ofte disse to begreber, hvilket er klinisk forkert.

Ved anvendelse af IFN i høje doser (> 1 million IE) udtrykkes AP-effekten primært i cytopeni. Cellerne i det hæmatopoietiske system er yderst følsomme for IFN. Dette hæmmer både vækst og evnen til at kolonisere i knoglemarv og milt. Reproduktion af mitogenstimulerede lymfocytter undertrykkes også. Lymfoide serier er som regel mere følsomme for IFN end myeloid. Det mindste påvirket af interferons virkning er erytropoiesis.

Imidlertid IFN anvendes i høje daglige doser (3-15 MIU), forårsagede cytoreduktion (reduktion af antallet af cirkulerende tumor leukocytter) fra et gennemsnit på 9 til 97,4x10 4,2x10 9 / l med faldende størrelse af milten [28] i patienter kronisk myeloid leukæmi. Effekten afhang af de anvendte doser af lægemidlet (det vil sige opnået på grund af AP-effekten), men yderligere foranstaltninger var nødvendige for at opnå antitumor-effekten og helbredelsen, herunder knoglemarvstransplantation.

AP effekt er reversibel. Efter indledningen af ​​IFN er hæmatopoiesis fuldstændig restaureret. Vækst af tumorceller genoptages også. For at opretholde AP-effekten i kroppen kræver den konstante indføring af høje doser af IFN.

AP virkning er afgjort forbundet med aktivering af 2', 5'-oligo (A) synthetase, som i de forskellige kulturer af overlap mellem Layer 2', 5'-oligoadenylates i cytoplasmaet og graden af ​​undertrykkelse af proliferation. Dette forhold er endnu ikke klart. En ting er ingen tvivl om, at de molekylære mekanismer i udviklingen af ​​AB og AP-stater i efterfølgende faser synes at være forskellige. For eksempel hæmmer kolera-toksin, der ændrer den fysisk-kemiske tilstand af den cytoplasmiske membran og niveauet af cAMP, udviklingen af ​​AV-tilstanden, men ikke AP-effekten [29]. Lignende handlinger har oubain, puromycin og cycloheximid i visse koncentrationer.

Celler i hudmuskel-, mesenkym- og epithelvæv i kroppen er normalt resistente over for AP-virkningen af ​​IFN. Den mest følsomme model, der bruges til at måle AP-effekten, anses for at være transformeret Daudi linje B-lymfocytter isoleret fra patienter med Burkitt's lymfom. I en retrospektiv analyse kan vi konkludere, at ved den antiproliferative potentiale er den mest aktive IFN-a. Det er ofte 10-20 gange mere effektivt end IFN-α. Aktiviteten af ​​IFN- og IFN- varierer afhængigt af typen af ​​celler, men oftere IFN- har fordele for hudmuskelvævcellerne. På antiproliferativ potentiale er følgende række af IFN gyldig: IFN-> IFN-> IFN-. Det skal huskes, at AP-effekten er iboende for alle IFN'er, og det manifesterer sig altid klinisk, når det anvendes i høje doser. Da det kliniske syndrom normalt er reversibel cytopeni, anbefales det at anvende IFN i daglige doser på> 1 million IE med hæmatopoietiske aktivatorer, fx med leukinferon.

AP-effekt manifesteres kun i interaktionen af ​​IFN med specifikke receptorer efterfulgt af en dyb krænkelse af syntesen af ​​makromolekyler. Cellemutanter, der har mistet deres receptor, bliver resistente over for både antivirale og antiproliferative virkninger. Det skal også tages i betragtning, at den antiproliferative effekt ved lave doser er cytostatisk: Cellevækst er fuldt restaureret efter fjernelse af IFN, selvom det tager tid - i det mindste 24 timer [30, 31].

En gennemgang af talrige observationer [32] førte til den konklusion, at den antiproliferative virkning af IFN er særligt udtalt i den forberedende tidsrum (fase G0, G1, G2), celler, hvor denne periode er kort, og DNA-syntese (S-perioden) er intens, eller de er i mitosfasen (M-fase), er mindre følsomme.

Det er kendt, at der er noget grundlæggende niveau af 2 ', 5'-oligoadenylat i cytoplasmaet, hvilket er nødvendigt for proliferation. Men med indførelsen af ​​IFN i de fleste væv, kan deres niveau stige med 10-15 gange. Således begynder musen, der modtager IFN- /, niveauet 2 ', 5'-oligoadenylater i milten, lungerne, leveren og i mindre grad i thymus og hjernen at stige i 2-5 timer [33]. I dette tilfælde vises for eksempel nye proteiner med molekylmasser på 15, 16, 20, 53, 79, 87 og 105 kDa i Daudi's cytoplasma, og niveauet af kun et protein falder - 23 kDa. I de mutante celler, der er resistente overfor AP-virkning af samme linje, induceres kun et protein, 15 kDa, tydeligt. Niveauet af andre proteiner er signifikant reduceret, men de registreres stadig. På samme tid blev ekspressionen af ​​den c-myc-cellulære proto-onkogen også undertrykt af IFN [34].

Hidtil er det kendt, at der i humant genom er ca. 40 cellulære proto-onkogener, der kun udtrykkes i embryonale celler, men lavaktive i modne. Ifølge publicerede data, for eksempel, Xenopus laevis under oocytmodning i hver af dem akkumulerer til 8 millioner kopier af genet med en-myc, i modne æg fase af niveau også fortsat meget høj - 5 millioner enheder, men derefter efter befrugtningen de fordeles i fission og hver tadpole-celle indeholder allerede kun 20-50 kopier af c-myc, dvs. omtrent det samme som en person.

I det humane genom er c-myc lidt udtrykt i modne celler. Imidlertid forekommer der i embryogenese såvel som under kirurgiske operationer, reparations- og regenereringsprocesser af en anden genese, c-myc og andre vækst-onkogener c-ras og c-abl. Disse proto-oncogener er absolut nødvendige for begyndelsen af ​​spredning. Aktivering af vækstproto-onkogener stimulerer celler til overgang fra fase G0/ G1 til efterfølgende trin i cellecyklussen - S, G2 og mitose (M). Vævsvækst er imidlertid genetisk bestemt og strengt kontrolleret med deltagelse af vækstfaktorer, kontakthæmning og apoptosefaktorer [22]. Hovedregulatoren for ekspression af vækstproto-oncogener er p53-proteinet, hvis gen er bredt repræsenteret i pattedyrgenomet.

I celler i det hæmatopoietiske system fører ekspression af p53-genet til et fysiologisk fænomen - programmeret død - apoptose. Forhindrer dette protein bcl-2-gen. Således, forøget ekspression af protoonkogener vækst skaber betingelser for en ukontrolleret vækst og malignitet (især punktmutationer, transformerende protooncogen til et onkogen, eller når de inkorporeres i det virale genom og viral enhancer virkning). Faldet i deres ekspression under virkningen af ​​IFN eller p53 (Rb protein er også involveret, hvilket ikke betragtes her) hæmmer vækst og proliferation. Men selvfølgelig er disse processer ikke begrænset til, faktisk er de meget mere komplicerede.

Ved tumor transformation bør aktivering af c-myc og andre vækst onkogener forekomme. Interessant er det, at ved konstatering af den transformerede fænotype er konstant ekspression af onkogener og den deraf følgende tilstedeværelse af oncoproteiner i cytoplasmaen nødvendig. Indførelsen af ​​oncoproteiner i en normal celle fører til udseendet af fænotypiske tegn på transformation, som begynder at forsvinde, når oncoproteinerne nedbrydes. Indførelsen af ​​antistoffer mod oncoproteiner i cytoplasmaet af transformerede celler fører også til en midlertidig genopretning af fænotypisk normale celler. Således kan en transformeret celle, der har mistet sine specifikke funktioner (differentiering) og karakteriseres ved ukontrolleret vækst, mens undertrykkelse af ekspression af vækst-onkogener under indflydelse af IFN, kan returneres til den fænotypiske norm. Det er ekstremt vigtigt at kende hver læge.

Der er flere måder at aktivere cellulære proto-onkogener - punktmutationer genomisk amplifikation, akkumulering af transkripter eller endelig translokation gener beskrevet for kronisk myeloid leukæmi (c-abl 09:22 genet) eller Burkitt-lymfom (gen-myc 08:14) [35]. Det translokerede gen påvirkes af den nye promotor og kan aktiveres. Onkogene virus, der bærer disse onkogener (normalt med mindre ændringer) og kan integrere dem i genomet, kan spille en vigtig rolle. Der er imidlertid ingen tvivl om, at punktmutationer i p53-genet, som findes i mindst 50% af tumorcellerne, der er karakteristiske for USA og England, er mest sandsynlige for humane tumorer [36]. Det antages, at mutationen af ​​p53-genet, som reducerer kontrollen over aktiviteten af ​​vækst-onkogener, kun skaber betingelser for tumorvækst. Deres kliniske manifestationer bør forventes i intervallet op til 30 år, når andre signaler slukkes eller mekanismerne for antitumorimmunitet svækkes.

IFN's evne til at forebygge antitumorprocesser er ubestridelig, hvis kun gennem effekten på ekspression af vækst onkogener. Men de studeres slet ikke.

Under anvendelse af eksemplet af c-myc-genet i Daudi-celler for første gang i 1984 viste det sig, at IFN type I kan betragtes som en negativ regulator af ekspressionen af ​​vækst onkogener, som i det mindste delvist forklarer AP-effekten i normale væv [37]. Senere blev denne effekt også observeret med en anden c-Ha-ras vækst onkogen. Effekten er oftere realiseret ved niveauet af onkogen-oversættelse (proteinniveau). Under anvendelse af c-myc-eksemplet blev det påvist, at p62 kDa DNA-bindende protein, som er et produkt af c-myc, er nødvendigt til ligering af Okazaki DNA-fragmenter i en enkelt helix. Dens undertrykkelse med indførelsen af ​​IFN forhindrer syntesen af ​​nyt DNA efterfulgt af inhibering af proliferation.

Der er imidlertid andre eksempler på replikationsinhibering uden en udtalt virkning på ekspressionen af ​​vækstproto-onkogener (celler i monocyt-serien I-937, HL-60, Ven erythroleukæmi, Balb c / 3T3). Systemet med 2 ', 5'-oligo (A) syntetase-RNase L kan spille en vigtig rolle i denne proces, hvilket sikrer den hurtige nedbrydning af nyligt syntetiseret mRNA, der kræves til proliferation [38].

Immunmodulerende virkninger

I næsten et årti har præparater af IFN været anvendt som antivirale midler, som kan beskytte cellen mod viral infektion uden deltagelse af immune effektorer. Selv om der allerede var en række kliniske observationer, fandtes stimuleringen af ​​reparative processer i sår, herunder de meget inficerede [39, 40] og omfattende forbrændinger [41] ikke i den generelle ordning og havde brug for ny tænkning [2].

Stor interesse blev tiltrukket af en undersøgelse udført på Primate Center i Holland, hvilket viste at aber inficeret med en meget modtagelig stamme af vacciniavirus eller dets mutant, resistent over for IFN, hvilket praktisk talt ikke er muligt i kroppen (> 10.000 IE) med efterfølgende Ved behandlingen af ​​IFN var der ingen signifikante forskelle i den kliniske dynamik og intensitet af den udviklede immunitet. I begge tilfælde forhindrede IFN virusskader. Dette indikerede den overordnede rolle af immuneffektorer aktiveret af IFN i processerne for eliminering af virus og efterfølgende klinisk opsving.

Ud fra dagens synspunkt kan det hævdes, at aktiveringen af ​​ikke-specifikke cellulære immunresponser og reguleringen af ​​effektorer i immunresponset tilsyneladende er hovedfunktionen af ​​IFN i kroppen [4]. Når interagerer med patogenet, produceres IFN'er af makrofager og lymfocytter, opstår der en inflammatorisk reaktion, hvilket fører til ødelæggelsen af ​​patogenet i fokus med minimal skade på normale væv. Det er kendt, at normalt helbred understøttes hovedsageligt af ikke-specifikke cellulære immunitetsreaktioner udført af den kendte triade af immun-effektorer: makrofage, T-hjælperlymfocyt og neutrofile fagocytter. Makrofagen i dette tilfælde betragtes som en universel antigen-præsenterende celle (APC), der præsenterer det forarbejdede antigen til T-lymfocytet sammen med aktiverende cytokiner. AIC'ens rolle udføres også af dendritiske celler og Langerhans-celler (hud). Men fænomenets essens ændrer sig ikke. AIC pålægger et behandlet antigen i kompleks med hovedhistokompatibilitetskomplekset (MHC) klasse 2 (virale og tumorantigener i kompleks med MHC klasse 1), som skal genkendes af T-cellereceptoren (TCR) af SD3 + lymfocytter. Det vides at immunogeniteten af ​​det behandlede antigen stiger med ca. 10.000 gange, og 100 komplekser af klasse 2 antigen + MHC er i stand til at interagere med 18.000 TCR [42]. Dette præger effektiviteten af ​​immungenkendelse.

En antigens rolle kan udføres med ethvert patogen, som først dræbes ved peroxiddræbende reaktioner, og derefter internaliseres. Efterfølgende ikke-specifikke reaktionsreaktioner er vist i fig. 1. Under antigenets virkning skal makrofagen aktiveres, hvilket producerer autokrin INF-a og IL-6. MHC klasse 2 antigener udtages ikke konstant på makrofagen, og deres udseende stimuleres af IFN-a og IL-4. Processen undertrykkes af den transformerende vækstfaktor TGF-a, som også kan fremstilles af makrofager. Kilden til IFN-er altid aktiverede T-lymfocytter.

Direkte kontakt mellem makrofagen og T-hjælperlymfocytten, som udføres gennem strukturen af ​​klasse 2 antigen + MHC og TCR, komplementeres også af transmembran-glycoproteinerne ICAM. Dette tilvejebringer en begrænsning af immunresponset, men er ikke tilstrækkeligt til at aktivere T-lymfocytter. Et andet signal er nødvendigt i form af et kompleks af cytokiner produceret af aktiverede makrofager. Disse er primært IFN-a, såvel som IL-1, IL-6, IL-12, TNF-a, som interagerer med den tilsvarende receptor på T-hjælpercellen.

Aktiveret T-hjælperlymfocyt, der understøtter makrofager, frigiver cytokiner, såsom IFN- (stimulerende ekspression af MHC klasse 2) og IL-4 (aktiverer klasse 1 MHC gener), MIF og LIF, der bevarer makrofager i kilden til inflammation og kolonistimulerende faktorer (CSF) - M-CSF og GM-CSF. På grund af den gensidigt afbalancerede virkning af aktiverede makrofager og T-hjælperlymfocytter opretholdes deres aktiveringstilstand, og amplifikation af immunresponsen opnås ved at accelerere differentieringen af ​​makrofager fra tidlige monocytter / makrofagprecursorer.

Aktiveringssignaler fra makrofager (IFN-, IL-1, TNF-a, IL-8, G-CSF og GM-CSF) og T-hjælperlymfocytter (IFN-, IL-3) opfattes af neutrofile fagocytter, der bidrager til deres differentiering og stimulerende fagocytiske funktion. Dette øger alle parametre for fagocytose - antallet af modne segmenterede neutrofiler, dannelsen af ​​peroxider, fagocytindekset og tallet og også (vigtigst) færdiggørelsen af ​​fagocytose. Vi kan sige, at denne cirkel lukker.

Det primære negative signal for hele systemet er IL-10, som kan produceres af både makrofager og T-lymfocytter. Men den vigtigste regulerende rolle i denne proces tilhører tilsyneladende T-lymfocytter. Specifikke antistoffer må ikke deltage i disse reaktioner.

Hele sæt cellulære antigenelimineringsreaktioner involverende makrofager (eller andre APC'er), T-lymfocytter og neutrofile fagocytter, hvor der ikke er behov for T-lymfocytproliferation og differentiering, kan betragtes som den første fase af immunresponset. Det er nært beslægtet med følgende - anden fase, som begynder på niveauet af prolifererende T-lymfocytter og bestemmer hovedretningen i de efterfølgende reaktioner af organismen til patogenet, når cellulære (eller især HRT) eller humorale veje for immunogenese begynder at tænde.

Den første fase af immunresponsen fungerer konstant og er tilsyneladende det vigtigste øjeblikkelige respons i kroppen med lave patogenbelastninger. Det tænder umiddelbart efter genkendelse af antigenet. Dens deltagere er immune effektorer, der er differentieret af dette øjeblik, men på den anden side er det hun der skaber grundlaget for efterfølgende immunreaktioner. Den beskyttende rolle af reaktionerne i den første fase af immunresponset er ekstremt høj og synes at være undervurderet af lægen.

Log ind på din konto

AN Moses, Ph.D. dyrlæge. Sciences, LLC "BIOTECH-FARM", Skt. Petersborg

PI Baryshnikov, dr. Våde. Videnskab, Professor, Altai AGAU, Barnaul

Familien af ​​cytokiner indbefatter interferoner (i det følgende omtalt som IFN), interleukiner, kemokiner, vækst og kolonistimulerende faktorer, der er signalerende polypeptidmolekyler af immunsystemet. Besidder et bredt spektrum af biologisk aktivitet, bestemmer de ikke blot et tilstrækkeligt niveau af immunresponset, men regulerer også interaktionerne mellem de vigtigste integrerende systemer i kroppen - det nervøse, immun og endokrine.

Virkningen og virkemekanismen for de fleste cytokiner karakteriseres ret helt. På grund af anvendelsen af ​​metoder til genteknologi og moderne bioteknologi fremstilles mange cytokiner i øjeblikket i form af rekombinante præparater, der er identiske med endogene molekyler, i en mængde, der er tilstrækkelig til deres kliniske anvendelse.

Mange mikroorganismer - bakterier, gær, vira - bruges som modtagere af fremmed genetisk materiale for at opnå rekombinante stammer - producenter af bioteknologiske produkter. Således opnåede rekombinante stammer af E. coli, der producerer interferoner, insulin, væksthormoner, en række antigener; Stammer af B. subtilis, der producerer interferon; gærproducerende interleukiner mv.

Anvendelsen af ​​rekombinante cytokiner, der tilvejebringer en tilstrækkelig og målrettet medicinsk korrektion af immundysfunktioner, øger effektiviteten af ​​immunterapi og behandling generelt. Cytokiner indført i kroppen kompensere for manglen på endogene regulatoriske molekyler og fuldstændig reproducere deres virkninger. Dette er især vigtigt under forhold med alvorlig eller kronisk patologi, når anvendelsen af ​​traditionelle immunmodulatorer eller inducerende cytokinesyntese er ubrugelig på grund af udtømmelsen af ​​immunsystemets kompensationsevne. I øjeblikket er terapi med rekombinante cytokiner et af de mest lovende og stadigt voksende områder inden for immunfarmakologi.

Således har antivirale og antiproliferative virkninger interferoner af den første type (i det følgende-IFN-a, IFN-P). Et særligt sted i lyset af moderne ideer om de molekylære mekanismer for immunrespons tilhører interferon gamma (herefter - IFN-y) - det regulatoriske cytokin af immunresponset.

På baggrund af rekombinante interferoner har forskellige virksomheder udviklet lægemidler til dyr og mennesker, der anvendes til behandling og forebyggelse af infektionssygdomme, primært viral ætiologi.

Rekombinant IFN i dyrenes og menneskers krop ved behandling og forebyggelse af sygdomme i forskellige etiologier giver en passende og målrettet medicinsk korrektion af immundysfunktioner, genopfyldning af defekten af ​​endogene regulatoriske molekyler og fuldstændig reproduktion af deres virkninger. Høj immunokorrektiv effektivitet, forudsigelighed og selektivitet af deres virkning skyldes tilstedeværelsen af ​​specifikke receptorer på cellerne og eksistensen af ​​naturlige mekanismer til deres eliminering. Farmaceutiske præparater baseret på rekombinant IFN er kraftige midler til patogenetisk immunorienteret terapi og har både en direkte erstatningseffekt og forskellige induktive virkninger. I øjeblikket er de meget udbredt i behandlingen af ​​infektiøse, onkologiske og nogle andre dyresygdomme.

Interferon klassificering

Interferoner (IFN, IFN) er det fælles navn, under hvilket der for øjeblikket forener en række biologisk aktive proteiner eller glycoproteiner med lignende egenskaber syntetiseret af kroppens celler under en beskyttende reaktion som reaktion på invasionen af ​​fremmede midler - en viral infektion eller antigene effekt. Takket være interferoner bliver cellerne immune overfor viruset.

Interferoner er en multigenisk familie af inducerbare cytokiner med forskellige funktioner, herunder antiviral, antiproliferativ, antitumor og immunmodulerende.

I øjeblikket er mere end 20 IFN'er kendt, forskelligt i struktur, biologiske egenskaber og den overvejende virkningsmekanisme. IFN er opdelt i tre typer:

• Type I, kendt som viral interferon, omfatter IFN-α (leukocyt, syntetiseret af aktiverede monocytter og B-lymfocytter), IFN-β (fibroblastisk, syntetiseret af fibroblaster, epithelceller og makrofager) og andre IFN'er. Den første type (IFN-α, IFN-β) er primært kendetegnet ved antivirale og anti-proliferative virkninger og i mindre grad - immunomodulerende virkninger. De produceres direkte efter et møde med patogenet - de er induceret i forbindelse med virusinfektion, deres handling er rettet mod at lokalisere patogenet og forhindre dets spredning i kroppen. IFN-a og -β-induktorer er virus, RNA (især dobbeltstrenget), lipopolysaccharider (LPS), komponenter af nogle bakterier. Blandt vira er de stærkeste interferoninducerende RNA-genomiske. DNA-vira er svage induktorer (med undtagelse af poxviruses).

• Type II, kendt som immun, omfatter IFN-y (syntetiseret af aktiverede T-lymfocytter og NK-celler). Hovedvirkningen af ​​interferoner af den anden type (IFN-y) er deltagelse i immunitetsreaktioner. Det begynder at blive produceret i de efterfølgende stadier af den infektiøse proces ved allerede sensibiliserede T-lymfocytter og deltager aktivt i kaskade af et specifikt immunrespons. Interferonogene stoffer, antigener, T-mitogener og nogle cytokiner er i stand til at fremkalde IFN-y-produktion. Målcellerne for IFN-y er makrofager, neutrofiler, naturlige dræberceller, cytotoksiske T-lymfocytter, som har receptorer på deres overflade til IFN-y. Produktionen af ​​IFN-y er under kontrol af cytokiner. IL-12 og IL-18 forstærker dets ekspression, og IL-2 bidrager til funktionen af ​​CD4 + lymfocytter, der aktiverer produktionen af ​​IFN-y. Baggrundsmængden af ​​IFN-y er altid til stede i kroppen, selvom der ikke er nogen infektion. For eksempel viser analysen af ​​interferonstatus hos raske mennesker og dyr altid en definerbar mængde IFN i blodet, når det stimuleres eller inficeres, øges det mange gange. Under herpesinfektion og i de sidste stadier af tumorprocessen er mængden af ​​IFN-y imidlertid tilbøjelig til nul, da herpesvirus og cancerceller producerer proteiner, der blokerer syntesen af ​​IFN-y. Derfor er interferoninducererne med herpesvirusinfektion og kræft meningsløst, de skal indføres i kroppen udefra.

• Type III blev opdaget senere på type I og type II; Oplysninger om det tyder på betydningen af ​​IFN type III i visse typer virusinfektioner.

Virale interferoner (IFN-α / β) induceres under viral infektion, og syntese af type II-interferoner (IFN-y) induceres af mitogene eller antigeniske stimuli. De fleste typer virusinficerede celler kan syntetisere IFN-a / β i cellekultur. I modsætning hertil syntetiseres IFN-y kun af nogle celler i immunsystemet, herunder naturlige killere (NK) -celler, CD4-T-celler og CDS-cytotoksiske suppressorceller.

Antiviral virkning af interferon

Interferoner virker ikke direkte på virussen. Under deres indflydelse bliver cellen resistent over for infektion. Interferoner er den første forsvarslinje mod en virusinfektion, da de begynder at blive produceret umiddelbart efter kontakt med virussen. Samtidig er sværhedsgraden af ​​svaret direkte proportional med infektionsdosis.

Nogle vira kan blokere den antivirale virkning af IFN. Adenovirus producerer for eksempel specifik RNA, som forhindrer aktiveringen af ​​proteinkinase.

Binding af IFN til receptoren inducerer tre samtidige forekommende processer i cellen, hvilket slutter:

• aktivering af latent endoribonuklease, hvilket fører til ødelæggelsen af ​​viralt RNA

• undertrykkelse af syntesen af ​​viral messenger RNA;

• undertrykkelse af viral konvolutionsproteinsyntese.

Disse mekanismer implementerer integreret den antivirale virkning, hvilket fører til undertrykkelsen af ​​viral replikation.

Immunmodulerende virkninger af interferon

IFN'er har ikke kun antivirale, men også immunmodulerende virkninger på grund af virkningen på ekspressionen af ​​receptorerne i det store histokompatibilitetskompleks (MHC). IFN forøger ekspressionen af ​​1. klasse MHC molekyler på alle typer af celler, hvorved genkendelsen af ​​inficerede celler ved hjælp af cytotoksiske T-lymfocytter (CTL) forbedres. Derudover forstærker IFN-y ekspressionen af ​​MHC klasse 2 molekyler på antigenpræsenterende celler, hvilket resulterer i forbedret præsentation af virale antigener til CD4 + lymfocytter og naturlige dræberceller (NK-celler) aktiveres. IFN'er stimulerer også fagocytose.

Reguleringen af ​​immunresponset af cytokiner, herunder interferoner, forekommer i overensstemmelse med relæprincippet, virkningen af ​​cytokin på cellen forårsager dannelsen af ​​andre cytokiner (cytokinkaskad).

Antiproliferativ virkning af interferon

Den antiproliferative virkning af IFN forklares ved følgende mekanismer:

• aktivering af cytotoksiske celler;

Øget ekspression af tumorassocierede antigener;

• Modulation af antistofproduktion

• hæmning af virkningen af ​​tumorvækstfaktorer

Inhibering af syntesen af ​​RNA- og tumorcelleproteiner;

• sænkning af cellecyklussen med en overgang til hvilepasen;

Stimulering af tumorceller til modne

• genoprettelse af restriktiv kontrol over proliferation

• hæmning af dannelsen af ​​nye blodkar i tumoren

• Biomodulation af cytostatisk aktivitet: En ændring i metabolisme og et fald i clearance;

• overvinde lægemiddelresistens på grund af inhibering af multi-lægemiddelresistensgener.

Antibakteriel virkning af interferon

I de senere år har det vist sig, at IFN også har en antibakteriel virkning, som er baseret på IFN's evne til at inducere aktiviteten af ​​visse enzymer i den berørte celle.

Desuden består den antibakterielle rolle af IFN-y i aktiveringen af ​​makrofager, der frembringer proinflammatoriske cytokiner, såvel som aktive former for oxygen og nitrogen, prostaglandiner. Disse faktorer bidrager til udviklingen af ​​den inflammatoriske proces, der fører til bakteriens død.

Således er alle interferoner en gruppe af polyfunktionelle proteinfaktorer med en udpræget antiviral og antitumorvirkning af forskellig grad. IFN-a har den stærkeste antivirale aktivitet blandt alle interferoner, og IFN-y har en mere udtalt antiproliferativ aktivitet. Alle interferoner har en immunoregulatorisk effekt af varierende sværhedsgrad (IFN-y har maksimum) - de øger aktiviteten af ​​makrofager, T-lymfocytter og NK-celler.

Forrige Artikel

Cancer - onkologi