PCR-assays

Kostvaner

Polymerasekædereaktion betragtes som en af ​​de mest præcise og hurtige diagnostiske metoder til mange infektionssygdomme. Det anvendes også med succes i kriminologi for at forenkle processen med at identificere kriminelle, med hjælp er fædre etableret med høj præcision.

Essensen af ​​PCR-metoden

Hver levende organisme, herunder bakterier og vira, har unikke gener, som er inkluderet i strukturen af ​​DNA eller RNA i en bestemt sekvens. Under PCR-undersøgelsen kopieres det genetiske materiale gentagne gange under indflydelse af DNA-polymerase og specielle temperaturcykluser.

Der er to hovedmetoder for polymerasekædereaktion:

  1. Den klassiske metode er udvælgelsen af ​​patogenens genetiske materiale ved elektroforese;
  2. PCR i "realtid".

Teknikken består af tre hovedfaser:

  • Prøveforberedelse;
  • DNA amplifikation;
  • Detektion (identifikation) af det genetiske materiale af det mistænkte patogen.

For at gennemføre en undersøgelse skal PCR laboratoriet opdeles i 3 zoner, hver fase af reaktionen udføres strengt i det rum, der er beregnet til det. Hver zone skal udstyres med det nødvendige udstyr, dispensere, forbrugsstoffer, beskyttelses tøj, der kun anvendes i dette rum.

Efter registrering og mærkning af prøver i prøvepræparationsrummet isoleres patogen-DNA'et eller RNA'et fra det undersøgte materiale ved udsættelse for en bestemt temperatur og specielle reagenser. Så begynder amplifikationsprocessen - skaber mange kopier af et unikt DNA-fragment. Den består af 3 hovedfaser:

  • DNA denaturering - under indflydelse af høj temperatur (95 grader) unger DNA dobbeltkernen i 2 kæder.
  • Primer Annealing - Særlige syntetiske forbindelser (primere), der er identiske med den genetiske information i enderne af de ønskede nukleinsyrefragmenter, er bundet til DNA-kædens termini. Den temperatur, der kræves til primerfastgørelse, er individuel i et bestemt tilfælde, det ligger fra 50 til 65 ° C.
  • Ved hjælp af DNA-polymerase enzym, ved 70-72 grader mellem to primere, afsluttes et tilsvarende afsnit af DNA (amplicon). Som "byggemateriale" tilføjes specielle stoffer til røret.

Amplifikationscykler gentages flere gange, derfor kopieres det ekstraherede DNA gentagne gange, hvilket forenkler processen med dens identifikation. Identifikation kan udføres visuelt efter proceduren for elektroforese af amplifikationsprodukter i en agarosegel eller automatisk ved anvendelse af realtids teknik.

I undersøgelsen af ​​PCR i "realtid" opstår amplifikation og detektion samtidigt i specielle enheder. Denne metode er mest foretrukket, da undersøgelsen udføres i lukkede rør, hvilket reducerer risikoen for kontaminering og følgelig udstedelsen af ​​falsk positive resultater.

Fordele og ulemper ved metoden

  • Undersøgelsen tager kun få timer i modsætning til de lange klassiske mikrobiologiske metoder;
  • Høj specificitet fra 95% til 100%, fordi det ønskede DNA-fragment er unikt for hver specifik mikroorganisme;
  • Metodenes høje følsomhed er det muligt at detektere patogenet, selv om det er repræsenteret i den undersøgte undersøgelse med kun en celle;
  • Identificere patogenet kan være både kvalitativ og kvantitativ metode. Dette er meget vigtigt i isolering af betinget patogene mikroorganismer, som i en lille mængde ikke forårsager sygdom;
  • Evnen til at bestemme patogenens genotype (hepatitis C, HIV-infektion). Det er nødvendigt for en rationel behandling og prognose af mulige komplikationer;
  • Evnen til at identificere en genetisk prædisponering for sygdommen og dermed forhindre dens udvikling.
  • Næsten enhver kilde til infektion kan identificeres, og moderne teknikker tillader også påvisning af aggregeret mikroflora i prøven under undersøgelse, for eksempel vaginalbiokenosen.
  • Muligheden for at opnå både en falsk positiv og en falsk-negativ prøve, hvis reglerne for at tage en prøve ikke følges, og der foretages fejl under undersøgelsen;
  • Kostprisanalyse.

ansøgning

Næsten enhver prøve kan undersøges ved hjælp af PCR (blod, urin, cerebrospinalvæske, skrabninger fra livmoderhalskanalen og urinrøret, hårsækkene, sæd osv.). Denne metode anvendes i vid udstrækning til diagnosticering af STD'er (gonoré, klamydia, ureaplasmose, mycoplasmosis, trichomoniasis). Det kan bruges til at identificere de forårsagende midler af tuberkulose, difteri, lungebetændelse, viral hepatitis, HIV-infektion, toxoplasmose, cytomegalovirus og herpesinfektion, salmonellose etc.

En polymerasekædereaktion anvendes til at etablere faderskab ved at sammenligne moderens og barnets DNA, identificere genetiske abnormiteter og arvelige dispositioner af kroppen til forskellige sygdomme.

Forberedelse til analysen

  • Blod anbefales at donere strengt på en tom mave.
  • Inden du tager et smear fra urinrøret eller livmoderhalsen, er det nødvendigt at afstå fra sex i tre dage, er det nødvendigt at tage analysen ikke tidligere end en måned efter afslutningen af ​​antibiotikabehandlingen, ellers kan resultatet være fejlagtigt. Selv det døde patogen er påvist ved PCR-metoden, derfor er det bedre at gennemføre undersøgelsen, efter at cellerne er fuldstændigt fornyet.
  • Urin samles i en steril beholder.

Svaret vil oftest være klar om et par dage afhængigt af laboratorieevnen.

Afkodningsresultater

Ved anvendelse af en kvalitativ teknik kan der kun være 2 mulige svar: positiv eller negativ. Et positivt resultat indikerer tilstedeværelsen af ​​den udskillede mikroorganisme i prøven, en negativ indikerer fraværet.

Det kvantitative resultat skal vurderes af den behandlende læge, en individuel tilgang anvendes i hvert enkelt tilfælde. Specialisten tager i betragtning spørgsmålet om behovet for behandling, doseringen af ​​lægemidler, angiver form og stadium af sygdommen, under hensyntagen til det modtagne svar.

Ved bestemmelse af den genetiske profil (prædisposition til trombofili, brystkræft) efter dechiffrering af resultatet kan lægen vurdere graden af ​​risiko for at udvikle sygdommen samt ordinere en særlig kost, forebyggende foranstaltninger.

Var siden hjælpsom? Del det i dit yndlings sociale netværk!

Hvad er PCR-analyse og viral belastning?

Polymerasekædereaktion (PCR) er en laboratoriemetode til bestemmelse af DNA og RNA. Det blev først testet for næsten et halvt århundrede siden af ​​den amerikanske Carey Mullis. Denne overfølsomme analyse er i stand til at identificere genombæreren ved hjælp af et enkeltkildemolekyle indeholdt i blod, spyt eller hud.

PCR-metoden har gode udsigter, anvendes ikke kun i medicin, men også inden for genteknologi og retsmedicinsk videnskab. Med det, klon og oprette nye typer af DNA, bestemme graden af ​​slægtskab. En kriminel identificeres af et epithelium, der findes på kriminalitetsscenen.

PCR-analyse for hepatitis - hvad laver de og hvorfor?

Hvorfor er en PCR-analyse nødvendig for mistænkt hepatitis C, hvad er det?

Hepatitis C-virus er en RNA-virus, der indeholder 6 genotyper og op til 500 subtyper. Af alle hepatitis har denne virus den højeste mutationskapacitet og overvinder den beskyttende barriere i immunsystemet. Af det samlede antal hepatitis tilfælde forårsagede C-virus 70% af tilfældene af den kroniske form og 30% af cirrose og levercancer.

Essensen af ​​metoden: En del af genet under undersøgelse ved hjælp af specielle enzymer og betingelser, der tvinger til at formere sig in vitro. PCR-analyse gør det muligt at bestemme virusstammen, uden hvilken det er umuligt at gennemføre effektiv behandling: Hver genotype er forskelligt følsom overfor antivirale lægemidler. Der anvendes to typer PCR:

Antiviral terapi kræver konstant overvågning for hurtigt at justere behandlingen, og til disse formål anvendes polymerasekædereaktion også.

Kvalitativ og kvantitativ PCR

PCR kvalitativ på hepatitis C giver svaret: Er der en stamme af virus C i patientens blod og hvilken. Genotyping er nødvendig for at tydeliggøre diagnosen, prognosen for sygdommen og bestemme tidspunktet for behandlingen.

Ifølge den accepterede klassifikation er et gen angivet med et tal, og en undertype er et lille latinsk brev.

Særligt præparat baseret på naturlige stoffer.

Pris af stoffet

Behandlingsanmeldelser

De første resultater mærkes efter en uge med administration.

Læs mere om stoffet

Kun 1 gang om dagen, 3 dråber

Instruktioner til brug

Dekryptering af genotype C-virusbordet:

  • Genotype 1a, 1b, 1c
  • Genotype 2a, 2b, 2c, 2 d
  • Genotype 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
  • Genotype 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
  • Genotype 5 a
  • Genotype 6 a

De mest almindelige genotyper 1,2,3. I Rusland er de mest almindelige 1a, 1b, 2 og 3 stammer af virus C.

Genotypen af ​​virus 1b er vanskeligere end andre at behandle, i 90% bliver det kronisk, hvoraf 30% genfødes som levercancer eller cirrose.

Genotyper 2a og 3a har en grad af kroniskitet på 33-50%, mere responsive overfor antiviral terapi.

Ved bekræftelse af virusets tilstedeværelse udføres en kvantitativ PCR-test for hepatitis C, som bruges til at beregne antallet af RNA-molekyler til stede i patientens laboratorieprøve.

Dekodningsanalyse

PCR-analyse af høj kvalitet har to svar:

PCR-negativ betyder, at patogenet ikke er påvist i blodprøver.
Et positivt svar antyder det modsatte: RNA af en eller anden genotype af virus C er fundet.

Sandsynligheden for pålideligheden af ​​resultatet er 95%. De resterende 5% er en fejl forårsaget af en person. Denne mulighed er tilladt på grund af de høje krav til undersøgelsen:

  • regler for opbevaring af reagenser
  • passende kvalifikationer for læger
  • biomaterial renhed.

PCR-kittet selv har 100% diagnostisk nøjagtighed.

Kvantitativ PCR af Hepatitis C RNA gør det muligt at bestemme viral belastningen på patientens krop. Med sin hjælp:

  • sygdomsfasen er specificeret (akut, kronisk);
  • bestemmer effektiviteten af ​​antiviral behandling
  • Behovet for en leverbiopsi undersøges.

I nogle tilfælde føler patienten ikke tegn på sygdommen, mens HCV-infektionen påvises ved PCR-metoden. Dette betyder, at sygdommen er på et tidligt stadium af udvikling eller i kronisk form. Yderligere undersøgelser er nødvendige for at afklare diagnosen, til den tidlige start af antiviral behandling.

Hepatitis C viral belastning

Viral belastning viser aktiviteten af ​​hepatisk virus, hvor aktiv reproduktionen forekommer.

Hvad er det her?

PCR-kvantitativ hepatitis C måles i internationale enheder pr. 1 ml eller IE / ml, hvilket betyder, hvor mange kopier af ribonukleinsyre af en bestemt stamme af virus C findes i 1 ml blod under test.

Hvad er højt, hvad er lavt?

Virusanalysen tillader at bestemme tilstedeværelsen af ​​viralt RNA i en koncentration på 50 IE / ml. Normal viral belastning er, når intet HCV RNA molekyle detekteres ved PCR.

Viral load bord:

  • lav koncentration på 600 IE / ml 3 * 104 IE / ml;
  • mediumkoncentration fra 3 * 104 IE / ml til 8 * 105 MM;
  • højt niveau mere end 8 * 105 IE / ml.

Lav viral belastning er et signal om, at terapeutisk behandling er valgt korrekt, og prognosen for en kur mod hepatitis C er gunstig.

En høj koncentration af virale celler indikerer, at sygdommen er i den akutte fase. Patientens blod er en farlig kilde til infektion.

Viral belastning, hvis indikatorer er på et gennemsnitligt niveau, karakteriserer enten den kroniske fase af HWS, eller kan have to udviklingstendenser: til dens stigning eller reduktion.

Efter færdiggørelsen udføres kontrol PCR efter 6 måneder.

Omkostninger ved PCR-diagnostik

Følgende symptomer skal være bekymrende:

  • generel svaghed
  • misfarvning af hud, øje sclera, udledning;
  • kvalme;
  • nedsat appetit
  • smerter i muskler og led
  • tyngde i den rigtige hypokondrium
  • forhøjede blodniveauer af AST og ALT.

I kontakt med inficerede patienter anbefales det også i blodprøven, at hæmodialyse undersøges.

Offentlige klinikker gør en blodprøve til PCR gratis, hvis der henvises fra en smitsomme sygeplejerske eller en hepatolog.

Betaltjenester til PCR-diagnostik leveres i alle større russiske byer. Omkostningerne afhænger af typen af ​​test, tilgængelig udstyr, timing og andre faktorer.

Højkvalitets PCR analyse i Moskva og Skt. Petersborg vil koste fra 600 til 900 rubler. I regionerne - fra 300 til 800 rubler.

Bestemmelsen af ​​hepatitis C viral belastning vil koste 17.000-22.000 rubler. For andre typer infektioner prisen på kvantitativ forskning: 1200-10000 rubler.

Fordele og ulemper ved PCR-metoden

Hvad er fordelene ved polymerasekædereaktionsmetoden over andre diagnostiske metoder?

  1. En bred vifte af applikationer. Ved hjælp af PCR, ved hjælp af standardudstyr, kan du identificere enhver virus.
  2. Nøjagtighed af bestemmelse af patogenet. Ved anvendelse af forskellige kombinationer af enzymer og analyseteknikker opnås en 100% specifikation af undersøgelsen for den angivne infektion.
  3. Høj følsomhed. Metoden gør det muligt at påvise tilstedeværelsen af ​​et virusmolekyle i blodet.
  4. Effektivitet. Kvalitativ analyse er klar om et par timer, kvantitativt - om to dage.
  5. Diagnose af virussen i inkubationsperioden. Under PCR bestemmes patogenet ikke ved tilstedeværelsen af ​​antistoffer, når kroppen har et immunrespons, men inden starten af ​​den patologiske proces, hvilket letter behandling.

Ulemper ved PCR er resultatet af dets fordele:

  • Analysens renhed kræver den højeste grad af renhed, herunder luft i laboratoriet, således at "fremmed" DNA ikke kommer ind i prøven under undersøgelse;
  • høje krav til personale involveret i indsamling og analyse af biomateriale.

Polymerase Chain Reaction - Patient Information

indhold

Polymerasekædereaktion (PCR) er en kompleks laboratoriemetode, der i vid udstrækning anvendes i medicin og andre videnskabelige grene. På et tidspunkt er PCR-diagnostik blevet et stort gennembrud inden for videnskaben. Vi kan sige, at dette er en af ​​de vigtigste opdagelser af det 20. århundrede i medicin. Til opdagelsen af ​​metoden modtog Keri Mullis, en biokemistforsker, i 1993 en nobelpris.

I lang tid har infektioner samlet en bitter hyldest fra menneskeheden. Pesten alene hævdede hundredtusindvis af liv i middelalderen. I den vellykkede kamp mod epidemier er et vigtigt punkt en korrekt og rettidig diagnose.

PCR-undersøgelser udføres normalt i laboratoriet på klinikken. På trods af at PCR-testen for infektion er ret dyr, er prisen opvejet af høj nøjagtighed. At lave en nøjagtig diagnose er nok til at gøre analysen en gang. Ved anvendelse af andre metoder kan der kræves yderligere eller gentagne analyser.

Hvordan er analysen for smitsomme sygdomme

Oftest anvendes serologiske og kulturelle metoder til at diagnosticere infektioner. I det første tilfælde bestemmes antistoffer mod det forårsagende middel af infektion i serum. I det andet tilfælde anvendes det biologiske materiale fra en syg person til plantning af et specielt miljø, der fremmer væksten af ​​patogenkolonier. I begge tilfælde kan diagnosen tage dage eller endda uger.

PCR-undersøgelse kan udføres med ethvert biologisk materiale, der opnås fra en syg person. Blod og andre biologiske, fysiologiske og patologiske væsker og medier kan tjene som prøver. Du kan udføre PCR urin eller afføring.

Ofte bestemmer PCR-metoden virale og atypiske infektioner, da de muligvis ikke kan anvendes til konventionel diagnostik på grund af arten af ​​den patologiske proces, de forårsager. For at diagnosticere disse infektioner tager det tid, hvor kroppen begynder at producere antistoffer, som bestemmes ved serologiske metoder. Men i nogle tilfælde er det uacceptabelt.

Ved hjælp af PCR kan den humane immunbristvirus bestemmes allerede i dage eller uger, så præcist som muligt uden den seronegative vindues periode, som er karakteristisk for andre metoder. (Et seronegativt vindue er intervallet fra infektions øjeblikket, hvor kroppen endnu ikke er begyndt at producere nok antistoffer til detektion).

Metoden til udførelse af PCR - in vitro betyder laboratoriebestemmelse af infektion i prøver isoleret fra patienten.

Der kræves et sæt specielle reagenser til udførelse af polymerasekædereaktionen.

I reagensglas med reagenser skal materialet undersøges. Rørene er placeret i en speciel enhed - en PCR-forstærker. Det tjener til at amplificere (øge antallet af) de ønskede DNA-fragmenter eller RNA. PCR-forstærkere kører i cyklisk tilstand. Hver cyklus, hvis DNA-sekvensen eller RNA-sekvensen af ​​patogenet er til stede i prøverne, akkumulerer kopier af disse nukleinsyrefragmenter i opløsningen. Det er muligt at bestemme både tilstedeværelsen af ​​patogenet og dets mængde i prøverne.

Typer af PCR

Analyse ved PCR - kvalitativ giver følgende resultat:

  • PCR - negativ, det ønskede patogen i prøverne blev ikke detekteret;
  • PCR - positivt er mønstrene fundet i prøverne karakteristiske for et eller andet patogen.

Når PCR-resultatet er positivt, indikerer det med 95% nøjagtighed forekomsten af ​​en diagnosticeret infektion. Nøjagtigheden af ​​PCR kits anvendt til diagnostik når 100%.

5% af fejlagtige resultater afhænger normalt af den menneskelige faktor. Således kan overtrædelser af reglerne for opbevaring af reagenser og forskningsteknikker reducere nøjagtigheden af ​​analyserne betydeligt.

Kvantitativ PCR analyse definerer sådan en ting som viral load. På samme tid er det muligt at bestemme, hvor mange prøver af patogenet der var indeholdt i de prøver, der blev opnået fra patienten. Jo mere - jo sværere infektionen fortsætter. Du kan også bestemme succesen af ​​behandlingen ved at reducere viral belastning.

Levering af biomateriale på PCR

PCR analyser udføres på klinikken, normalt om morgenen. Under et besøg hos lægen vil du blive fortalt, at du skal donere: blod, urin, smøring eller skrabning. PCR er i stand til at identificere patogener uanset graden af ​​forurening af materialet.

I teorien er tilstedeværelsen af ​​kun ét patogen i prøver tilstrækkeligt til en positiv analyse. I praksis forsøger de at skabe gunstigere forhold. Der er nogle regler for dette:

  • hvis du smider eller skraber fra kønsorganerne, bør du afstå fra samleje 3 dage før testen;
  • bør ikke vaskes eller bruses med antibakterielle midler på tærsklen til testen;
  • 3 timer før smøring fra urinrøret skal være tålmodig og ikke urinere.

I det tilfælde, hvor patienten donerer blod, kan du ikke overholde disse regler.

Forskningsresultater

Resultaterne af PCR er normalt klar inden for en dag efter testen. Kvalitativ analyse ser let ud. PCR-dekodning er ikke påkrævet, som normalt i den første kolonne angiver patogenet i det andet - resultatet. For eksempel:

Kvantitativ PCR

Kvantitativ PCR (kvantitativ PCR, qPCR,) er realtids kvantitativ PCR (realtids polymerasekædereaktion, kvantiseret polymerasekædereaktion, qPCR).

Kvantitativ PCR (græske polymerer - bestående af mange dele, forskelligt; Lat. Re-prefix, der angiver gentagelse af handlingen og actio-action) - en variant af PCR, hvor reaktionens kinetik kontinuerligt registreres, hvilket gør det muligt at kvantificere indholdet af visse nukleotid-DNA-sekvenser i en kompleks blanding af molekyler.

Den første version af denne metode blev foreslået af P. Holland et al. i 1991 (metode "TaqMan"). Ifølge protokollen sættes der i tillæg til de sædvanlige to primere en oligonukleotidprobe mærket ved 5'-enden med en fluorofor og indeholdende en fluorescensdæmper i sin centrale eller 3'-del, som anneales i hver reaktionscyklus med amplicons centrale region (2) mellem to forstærkere, tilsættes til reaktionsblandingen primere. Sonden i sig anvendes ikke som en primer, da den 3'-terminale hydroxylgruppe er blokeret af orthophosphat. Under reaktionen forskyder den termostabile Taq-polymerase sonden fra duplexet, og den aftager derfor på grund af sin 5'-3'-exonukleaseaktivitet dets 5'-terminale nukleotid mærket med en fluorofor. Jo højere koncentrationen af ​​den amplificerede nukleotidsekvens i reaktionsblandingen er, desto mindre er antallet af cyklusser krævet for fluorescensintensiteten af ​​den frigivne fluorofor i prøven for at overstige det frie probes basale niveau med en lyddæmper. Fra dette øjeblik (tærsklen for antallet af cyklusser) bliver det muligt at observere kinetikken af ​​den faktiske akkumulering af fluoroforet i reaktionsblandingen.

Ved anvendelse af kvantitative PCR-metoder findes kvalitative ændringer i generne: punktmutationer, deletioner og insertioner. Imidlertid forekommer der i nogle arvelige sygdomme de tilsvarende symptomer som følge af en ændring i dosen af ​​bestemte gener.

Et typisk eksempel på en arvelig sygdom forårsaget af en ændring i antallet af kopier af en del af kromosom 21 i det humane genom er Downs syndrom. Cytogenetisk kan denne sygdom diagnosticeres ved tromomi af kromosom 21 eller ved tilstedeværelsen af ​​store translokationer af en del af dette kromosom til andre på baggrund af forekomsten af ​​to normale kromosomer 21. Kliniske tilfælde af Downs syndrom, hvor der ikke er synlige ændringer i karyotypen, er beskrevet. Dette skyldes duplikationen af ​​en lille del af kromosomet 21. Identifikationen af ​​sådanne mutationer er umulig ved anvendelse af traditionelle cytogenetiske metoder. Ved anvendelse af kvantitativ PCR bliver bestemmelsen af ​​den en og en halv stigning i dosis af den tilsvarende del af kromosom 21 imidlertid fuldstændig reel.

Gennemførelsen af ​​kvantitativ PCR er karakteriseret ved to træk. For det første udføres PCR i nærvær af deoxyribonucleosidtrifosfater eller primere mærket med en radioaktiv eller fluorescerende label for nøjagtigt at bestemme mængden af ​​dannet PCR-produkt. For det andet er det nødvendigt at færdiggøre reaktionen tidligt nok under PCR, indtil der er dannet for mange PCR-produkter. Dette skyldes det faktum, at i de sidste mætningsfase, når PCR-produkter bliver for mange, bliver substraterne (deoxyribonucleosidtrifosfater) og selve enzymet, for hvilke molekyler bliver for meget template DNA i form af PCR-produkter, blevet reaktionsbegrænsende enheder. Under sådanne forhold ledsages færdiggørelsen af ​​den næste PCR-cyklus ikke længere af en fordobling af antallet af PCR-produkter, og små kvantitative forskelle udjævnes mellem forskellige prøver, som er helt klart påvist i de tidlige stadier af PCR efter flere reaktionscykler.

Den oprindelige metode til identifikation af deletioner, der er heterozygote eller lokaliseret i autosomale gener, er baseret på anvendelse af cDNA opnået ved revers transkription fra ektopisk mRNA eller fra mRNA isoleret fra en patients væv eller cellekultur, der udtrykker dette gen til PCR. I modsætning til den normale homolog, i et mutant cDNA-molekyle, er de exoner, der grænser op til sletningen, tæt sammen. Hvis sekvenser fra disse regioner af genet er valgt som oligoprimere til PCR, vil kun det mutante cDNA tjene som en skabelon til amplificering af en lille region mellem primere fra exoner, der flankerer deletionen. I den normale cDNA-sekvens kan denne region være for stor til amplifikation at finde sted. Praktisk set til påvisning af heterozygoter ved hjælp af omfattende intragentiske divisioner udføres multiplex-PCR ved anvendelse af et oligoprimer system, der amplificerer fragmenter, der fuldstændigt overlapper hele cDNA molekylet. Tilstedeværelsen af ​​deletioner registreres ved udseendet af amplifikationsprodukter af en usædvanlig størrelse.

Se også Reverse Transcription - Realtid Polymerase Chain Reaction.

Ordliste for bioteknologi VZ Tarantula: alfabetisk indeks Ligation metoder "i nabolaget", metoden for tæt ligation (pro-ximity ligation assay, PLA) Molekylære beacons (molekylære beacons) MUTATIONER DOT: METODER IDENTIFIKATION METODER TIL DETEKTION AF KENDTE MUTATIONER

PCR-diagnostik gør det ikke bare muligt at bestemme tilstedeværelsen af ​​hepatitis B-virus i blodet og dets ætiologi, men også for at evaluere dens aktivitet. Detektion af viral belastning er særlig vigtig for udvælgelsen af ​​effektiv behandling, hvis den er for høj, så falder sandsynligheden for tilbagegang. Hvad er kernen i polymerasekædereaktionsmetoden?

Essensen af ​​PCR-diagnostik

I tilfælde af hepatitis udføres PCR for at sikre, at diagnosen er lavet. Ved hjælp af denne metode kan du identificere virusets DNA såvel som bestemme dets mængde i blodet.

DNA-virus i blodet ved PCR-metoden til hepatitis kan detekteres ved inkubationsperiodens slutning, på dette tidspunkt kan HBsAg detekteres på baggrund af et øget niveau af transaminaser, hvorefter HBeAg fremkommer.

Med en kvalitativ definition kan du nøjagtigt etablere diagnosen, der er, eller der er ingen hepatitis. Normalt bør der ikke være noget DNA i blodet. Den kvantitative metode gør det muligt at bestemme intensiteten af ​​sygdommens udvikling og reproduktion af virussen.

Analysen har en meget høj følsomhed og pålidelighed. Som et biologisk materiale tages venøst ​​blod. Takket være moderne teknologi kan PCR'en registrere viruset i en koncentration på 5 × 103-104 kopier / ml i blodet. Ifølge resultaterne af analysen ved at kende normen er det muligt at bedømme virusbelastningen og forudsige behandlingen.

Det er vigtigt! Det er virusets DNA, der bidrager til udviklingen af ​​cirrose og andre kroniske leversygdomme.

DNA-detektion ved hjælp af PCR er nødvendigt i følgende tilfælde:

Tvivler i formuleringen af ​​den endelige analyse efter test. Bestemmelse af sygdommens akutte stadium. Påvisning af latente former for hepatitis. Evaluering af effekt efter antiviral terapi.

Hvordan dechifreres resultaterne efter PCR-diagnostik?

PCR-kvantitativ

Ved kvantitativ vurdering kan du ikke kun bestemme tilstedeværelsen af ​​en virus, men også finde ud af viral belastningen, hvis PCR viser et positivt resultat.

En kvantitativ metode er nødvendig for at finde ud af sådan information:

Intensiteten af ​​sygdommens udvikling. Effektiviteten af ​​behandlingen. Udviklingen af ​​resistens overfor antivirale lægemidler.

Kvantificering er meget vigtig, når man foretager en diagnose af kronisk hepatitis. I dette tilfælde vil alle indikatorer ikke ligge inden for det normale interval. Transaminase niveauet vil blive forøget, virusaktivitetsindekset vil være mere end 4, og virus-DNA-koncentrationen vil være mere end 105 kopier af DNA / ml. Hvis viruskoncentrationen er lavere, og transaminasniveauet er normalt, så kan vi tale om passiv bærer.

Før udnævnelsen af ​​antiviral behandling er passage af PCR-diagnostik, nemlig kvantitativ undersøgelse, afgørende for at bestemme viralbelastningen.

Gør analysen hver 3. måned, og hvis viral belastningen øges 10 gange, så kan vi tale om virusets modstand til behandling.

Kvantitativ analyse giver meget vigtige oplysninger, fordi du kan bestemme, hvor meget patogenets DNA er i blodet. Jo større mængde der er, desto større viral belastning og jo mere alvorlig patientens tilstand. Ved at reducere viral belastning efter behandling, kan man dømme dens effektivitet. I nogle tilfælde er PCR for hepatitis en indikation for yderligere test, såsom en leverbiopsi. Ved forhøjede niveauer af ALT udføres PCR. Dekryptering af test er som følger: Hvis virusbelastningen er mere end 105 kopier af DNA / ml, og ALT-niveauet overskrider normen, men ikke mere end 2 gange over et halvt år, så har en sådan patient en biopsi. Ved stærk betændelse eller fibrose er antiviral behandling indikeret. Hvis ALT-niveauet overskrider normen med mere end 2 gange med høj viral belastning, ordineres behandlingen straks uden yderligere diagnostik.

Kun gode specialister vil kunne dechiffrere resultaterne af kvantitativ PCR korrekt.

PCR-kvalitet

Kvalitativ analyse gør det muligt at bestemme tilstedeværelsen af ​​hepatitis B i blodet. Normalt bør det være fraværende. Med denne metode kan du nøjagtigt etablere diagnosen.

PCR-analyse af høj kvalitet giver et 100% nøjagtigt resultat.

Ingen anden metode giver sådanne pålidelige data. I mere end halvdelen af ​​tilfældene efter at have passeret diagnosen detekteres virusets DNA i fravær af antigen. Det er meget vigtigt at etablere diagnosen i begyndelsen af ​​sygdommen.

Det er bevist, at hvis DNA'et af hepatitis B-viruset aktivt replikerer i menneskekroppen i to måneder, bliver sygdommen kronisk. Hvis vi begynder at kæmpe for virussen allerede i de første uger efter infektion, er chancerne for en fuldstændig opsving meget høj.

Hvordan er afkodningen af ​​de opnåede resultater af undersøgelsen ved hjælp af den kvalitative metode?

Afkodningsanalyse er meget enkel:

Normalt skal resultatet være negativt, det vil sige, at virusets DNA ikke blev detekteret. Et positivt resultat indikerer tilstedeværelsen af ​​hepatitis.

Analysen hjælper med at identificere virussen, bestemme genotypen og starte behandling rettidigt. Meget ofte, i nærværelse af DNA, sammen med en kvalitativ vurdering, udfører de også en kvantitativ.

Hvordan forbereder man sig på undersøgelsen?

Ved analyse af hepatitis ved anvendelse af PCR-diagnostik tages blod fra en ven. Det er bedst at undersøge om morgenen, da blod altid skal doneres på tom mave (efter det sidste måltid skal mindst 8 timer passere).

For at analysen skal være så pålidelig som muligt, skal patienten være opmærksom på nogle faktorer, som kan påvirke det endelige resultat:

Før du donerer blod fra en vene, skal du hvile i 20 minutter. Desuden gives analysen på tom mave, så i yderligere 12 timer kan du ikke drikke alkohol, ryge, spille sport og spise fedtholdige fødevarer. Nogle lægemidler, som patienten skal tage, kan påvirke det endelige resultat. Laboratoriet skal være opmærksom på behandlingen af ​​lægemidler. Hvis blodet skal doneres til et barn under 5 år, så er det i dette tilfælde nødvendigt at drikke det hvert 10. minut, en halv time før diagnosen. på et glas kogt vand.

Det er meget vigtigt at gennemgå PCR i en klinik, der har fungeret godt. På trods af det faktum, at PCR detekterer tilstedeværelsen af ​​en virus med en nøjagtighed på op til 100%, kan denne tal faktisk reduceres til 95% i betragtning af den menneskelige faktor.

Ukvalificerede teknikere eller et dårligt ry kan resultere i falske resultater.

Kvantitativ PCR-analyse tager sigte på at bestemme koncentrationen

Polymerasekædereaktion (PCR) er i dag et af de mest effektive diagnostiske metoder.

Det giver de mest nøjagtige og pålidelige resultater.

Materialet i undersøgelsen er:

Ved hjælp af PCR diagnosticeres selv latente infektioner, især seksuelt overførte infektioner.

Essensen af ​​denne analyse er at detektere patogenets genom i det undersøgte materiale ved gentagen syntese af dets DNA molekyler.

Ved hjælp af PCR kan bakterielle, virale, protozoale og svampeinfektioner diagnosticeres.

Den maksimale fejl i denne undersøgelse overstiger ikke 5%.

Desuden kan resultaterne opnås allerede på testdagen.

Der er to typer analyser ved hjælp af PCR:

Den kvalitative metode udføres for at detektere sygdomsfremkaldende middel i biomaterialet.

PCR kvantitativ analyse

Polymerasekædereaktion - en metode til laboratoriediagnose.

PCR-testen er meget anvendelig i medicin.

Dette skyldes den høje nøjagtighed.

Grundlaget for metoden er bestemmelsen af ​​DNA'et af mikroorganismer.

Udfør PCR-diagnostik som regel i laboratoriet.

Når der kræves kvantitativ analyse af PCR-udtværinger og blod

Denne metode anvendes i urologi, gynækologi, venerologi.

Ofte er det nødvendigt for diagnosen.

Ved hjælp af PCR-test kan du registrere sådanne sygdomme som:

  • gonoré
  • syfilis
  • ureaplasmosis
  • klamydia
  • trichomoniasis
  • Humant papillomvirus.

Denne metode anvendes også til fremstilling af donorblod.

Det undgår risikoen for transfusion af inficeret blod.

Kvantitativ analyse af PCR sigter mod at bestemme koncentrationen af ​​patogenet i kroppen, dvs. vurdering af graden af ​​"smitte" hos patienten.

Kvantitativ PCR er en uundværlig metode til laboratoriediagnose af viral hepatitis C.

Med det bestemme indholdet i patientens blod RNA af viruset, udtrykke det i IE (internationale enheder) eller kopier pr. 1 ml.

I tilfælde, hvor hepatitis C allerede er diagnosticeret, udføres kvantitativ analyse af PCR i henhold til følgende skema:

Er det nødvendigt at forberede sig på kvantitativ PCR analyse?

Nej, der er ikke behov for særlig træning i dette tilfælde.

Den eneste betingelse er at afholde sig fra at ryge 30 minutter før donation af blod.

PCR-kvantitativ: hepatitis C

Hepatitis C er en smitsom sygdom, der primært påvirker leveren.

Infektionen trænger gennem blodet.

For at identificere årsagen til denne sygdom anvendes en kvantitativ PCR-test.

Det bestemmer koncentrationen af ​​patogenet i patientens blod.

For at bestemme omfanget af sygdommen, gør RNA hepatitis C kvantitativt.

Oftest udføres PCR af hepatitis C efter påvisning af de tilsvarende antistoffer.

Derefter udføres testen på 4, 12, 24 uger og derefter om året.

Resultaterne af kvantitativ analyse af PCR ved diagnosticering af hepatitis C

At passere det korrekte materiale til analysen af ​​PCR er vigtigt.

Du skal dog kunne dechiffrere resultaterne korrekt.

Hvordan fortolker man resultaterne af kvantitativ analyse af PCR ved diagnosen hepatitis C og bestemmer effektiviteten af ​​behandlingen?

Det er værd at bemærke, at hepatitis C-viruset er ekstremt heterogen, modstandsdygtigt over for det ydre miljø.

Med sin lave koncentration i blodet er det ikke sandsynligt, at overførslen er lodret eller gennem seksuel kontakt.

Infektion og sygdom forekommer oftere hos mennesker med svækket immunforsvar.

Eller samtidig smitsomme sygdomme i urinvejen (HIV, kønsinfektioner).

Venerolog, at passere den kvantitative analyse af PCR

Husk! Dekryptere data bør kun læge.

Det er muligt at få et falsk resultat.

Det afhænger af, hvordan materialet blev transporteret, den arbejdsplads, hvor blodet blev taget til forskning, krænkelse af analyseteknologien.

Derfor skal du være opmærksom på, når du vælger et laboratorium.

Smør PCR-kvantitativ på chlamydia

Inden du tager en PCR-test for denne infektion, bør du vide, hvordan du forbereder dig til analysen.

Advarsel! Kvinder tager ikke materiale under menstruationscyklussen.

En vatpind bør kun tages, hvis visse regler overholdes:

  • Brug ikke vaginale suppositorier før testning.
  • Afvise fra samleje på tidspunktet for analysen
  • To uger før forskningsnotat antibiotika

Smøre i kvinder taget fra vagina.

Mænd gør skrabning fra urinrøret.

Materialet tages med en speciel steril probe, hvorefter den anbringes i et sterilt rør.

Resultatet kan være:

  • Negativ - ingen infektion i biomaterialet;
  • Positive - Chlamydia er til stede i smøret.

Kvantitativ PCR analyse: HPV 21 type

Ved hjælp af denne metode kan du straks bestemme typen af ​​virus.

Denne type HPV er almindelig.

HPV, der er mere end 100 arter.

De fleste af dem påvirker huden, de resterende slimhinder.

Der er arter, der kan forårsage kræft, såsom livmoderhalskræft.

Til analysen af ​​at gøre samlingen af ​​epithelceller fra livmoderhalsen.

Resultaterne kan være som følger:

  • Risiko ikke påvist 0-3 Lg (HPV / 105)
  • Muligheden for udseende af dysplasi 3-5 lg (HPV / 105)
  • Høj sandsynlighed for dysplasi 5 og højere Lg (HPV / 105)

DNA-PCR: detekteret

Resultatet af PCR-analysen er positiv - i patientens biologiske materiale blev DNA-fragmenterne fra mikroorganismen fundet.

Hvis du får dette resultat, skal du starte behandlingen så hurtigt som muligt.

Der er tilfælde, hvor resultatet er positivt, men personen føler sig normal, og der er ingen tegn på sygdommen.

Dette kan betyde, at sygdommen er i dets indledende faser.

I dette tilfælde bør du konsultere en læge og starte behandlingen.

Advarsel! Resultatet af analysen er ikke en diagnose. Behandlingsregimen skal ordineres af en læge.

Om nødvendigt udpeger en specialist at gennemgå gentagne undersøgelser,

Til hvilken læge der skal omdannes til kvantitativ analyse af PCR

For at foretage en kvantitativ PCR analyse skal du kontakte klinikken.

Moderne laboratorieudstyr giver nøjagtig PCR-analyse.

Du kan passere et smør, når du besøger venerologen.

Lægen vil undersøge og tage materialet til forskning.

Efter at have modtaget resultatet, hjælper specialisten dig med at dechiffrere resultatet og foreskrive det nødvendige behandlingsforløb.

Få en omfattende høring af en erfaren venerolog, gennemgå en kvantitativ analyse af PCR, samt et kursus af effektiv terapi, du kan kontakte vores betalte KVD.

Husk at høj kvalitet og rettidig diagnose er nøglen til en vellykket behandling og din chance for genopretning.

Hvordan er kvantitativ
PCR analyse fortæller
Løjtnant Oberst af Lægetjenesten,
Læge Lenkin Sergey G.

Om nødvendigt skal enhver kvantitativ PCR-analyse, herunder hepatitis C, kontakte forfatteren af ​​denne artikel - venerolog, urolog i Moskva med 15 års erfaring.

  • blodet
  • urin
  • prostatajuice
  • sædvæske
  • kvalitative og kvantitative
  • Før starten af ​​hans medicin
  • 1 uge efter start af behandlingen
  • På den 4. uge af behandlingen
  • På den 12. uge - på dette tidspunkt tillader kvantitativ bestemmelse af PCR at evaluere effektiviteten af ​​sygdomsbehandling
  • Ved den 24. behandlingsuge - en afsluttende undersøgelse for at bekræfte inddrivelsen
  • Niveauet af viremia eller viral belastning (viruskoncentration i blodet) på 800.000 IE / ml betragtes som høj.

At få disse resultater betyder den akutte fase af sygdommen eller reaktivering af virussen.

Denne indikator angiver en høj grad af infektivitet, "smitte" hos en person. Den kendsgerning, at faren for at være inficeret med en virus fra ham, er for øjeblikket meget høj.

  • Indikatoren 400 000 IE / ml indikerer et lavt virusindhold.

Dette kan observeres med en høj grad af kropsbestandighed.

Som følge heraf undertrykkes reproduktionen og aktiviteten af ​​virusen. Eller når man tager sig af, takket være effektiv terapi.

I nogle tilfælde viser analyseresultaterne indikatoren "under måleområdet."

Dette betyder, at koncentrationen af ​​viruset i blodet er ubetydelig.

Men alligevel er viruset til stede i kroppen, hvilket bekræfter PCR af høj kvalitet.

En indtastning i formularen "Ikke detekteret" analyseresultat indikerer, at der ikke er virus i patientens blod.

PCR-analyse for hepatitis C

Diagnose af hepatitis omfatter en række tests til bestemmelse af tilstedeværelsen af ​​en virus i blodet. En af måderne til at opdage en sygdom er en sådan forskningsmetode som PCR for hepatitis C. Hvad er det, hvorfor er analysen af ​​PCR for hepatitis så vigtig som den udføres og dechiffreres?

Hvad er det

Polymerasekædereaktion eller PCR anvendes til at diagnosticere mavesår, colitis, enteritis. Men den største fordel ligger i, at det hjælper med at detektere både hepatitis C-viruset og antistoffer i kroppen, som har evnen til ikke at forårsage immunsystemreaktioner på grund af deres evne til at mutere.

Undersøgelsen og dens essens ligger i skabelsen af ​​visse betingelser under hvilke kædereaktionen af ​​hepatitis RNA forekommer. Hvis der i sammenligning med nukleotidsekvensen af ​​hepatitis C-viruset findes tilfældigheder, hvilket tyder på, at der er viruspartikler i blodet, og der opstår desintegrationsprocesser i leveren. Hvis mængden af ​​virus er under et bestemt niveau, laves en negativ diagnose, og hvis højere, en positiv en.

Der findes to typer blodprøver ved hjælp af PCR-metoden til hepatitis: kvantitativ analyse og kvalitativ analyse.

Kvantitativ PCR, som nævnt ovenfor, bestemmer koncentrationen af ​​RNA i hepatitisviruset. Desuden er han i stand til at give information om intensiteten med hvilken patologien udvikler sig og effektiviteten af ​​den foreskrevne behandling. En kvantitativ analyse af hepatitis C er yderst vigtig, fordi det løser modstand mod virkningen af ​​antivirale lægemidler og giver dig mulighed for at justere behandlingen.

Efter at patienten har gennemgået en behandling, hjælper PCR med at bestemme den videre rækkefølge af aftaler. I nogle tilfælde er behovet for yderligere undersøgelser. For eksempel, hvis niveauet af ALP er forøget (men ikke mere end 2 gange inden for seks måneder), og transskriptionen af ​​analysen indikerer en viral belastning over 105 IE / ml, ordineres patienten en biopsi. Hvis en kvantitativ analyse af PCR afslører en stærk inflammation og fibrose, ordineres patienten et behandlingsforløb med antivirale lægemidler.

I situationer hvor et stort antal virale partikler kombineres med et højt ALT, skal patienten straks behandles uden yderligere diagnostiske foranstaltninger.

Tage denne test og find ud af, om du har leverproblemer.

Kun kvalificerede og erfarne specialister kan dechifitere kvalitativt i kvantitativ analyse af blod til hepatitis, og moderne teknologier hjælper med at gøre dette med en lav koncentration af viruset i blodet.

Kvalitativ analyse af PCR er rettet mod at bestemme og bekræfte den faktiske tilstedeværelse af viruset i kroppen. Det udføres, når antistoffer mod hepatitis opdages i blodet. Det er en kvalitativ analyse af hepatitis, der garanterer nøjagtigheden af ​​resultatet med 100% og giver dig mulighed for at foretage en diagnose i de tidlige stadier af sygdommen, hvilket gør det muligt at starte kampen mod hepatitis allerede i de første uger efter infektion og øger chancerne for fuldstændig opsving (i tilfælde af sygdomstype B).

Fordele ved PCR

I undersøgelsen ved hjælp af PCR og dechiffrering af en blodprøve for hepatitis, kan du også bestemme patogenens genotype. I alt er der seks genotyper af viruset og et stort antal subtyper, men i vores region er 1, 2 og 3 genotyper blevet almindelige.

Andre fordele ved denne type diagnose er:

  • høj nøjagtighed af de opnåede indikatorer og lav sandsynlighed for fejl i dem
  • høj følsomhed over for virale partikler i blodet
  • muligheden for at identificere flere patogener på én gang
  • diagnose af patogene intracellulære mikroorganismer med høj antigenvariation
  • At arbejde med afkodningen af ​​analysen for hepatitis gør det muligt at opdage skjulte strøminfektioner.

Hvem er udpeget

Følgende kategorier af mennesker skal passere PCR-analysen for hepatitis:

  • gravide kvinder;
  • sundhedspersonale;
  • potentielle blod- og organdonorer;
  • dem, der har karakteristiske tegn på sygdommen
  • HIV-inficerede individer;
  • stofmisbrugere
  • person, promiskuøs.

Hvordan udføres analysen, og der kræves træning for det

Blodprøveudtagning til PCR udføres fra en vene. Som regel sker dette om morgenen, før personen har spist, for efter at have spist et måltid skal mindst 8 timer passere. I ekstreme tilfælde kan blod tages til undersøgelse om dagen eller aftenen, men tidsgabet mellem analyse og fødeindtag skal være mindst 5 timer.

Den menneskelige faktor kan kvantitativt påvirke resultaterne: deres nøjagtighed falder i nogle tilfælde fra 100% til 95%, derfor er det nødvendigt at forberede bloddonation på forhånd. Kvaliteten af ​​biomaterialet til analyse vil være hensigtsmæssigt, når patienten følger følgende regler:

  • før du giver blod, kan du kun drikke rent vand
  • to dage før undersøgelsen er det nødvendigt at nægte at acceptere stegte og fede fødevarer samt alkoholholdige drikkevarer
  • en dag før laboratoriet skal stoppe med at tage medicin. Hvis dette ikke er muligt, er det afgørende at underrette laboratorietekniker og den behandlende læge;
  • dagen før du skal undgå stressede situationer og fysisk anstrengelse
  • ultralyd, røntgen og instrumentelle undersøgelser bør ikke udføres kort før bloddonation;
  • i timen før analysen skal du afstå fra at ryge
  • 20 minutter før du donerer blod, skal du blive distraheret, roen ned og trække vejret ud.

Hvis et barn under 5 år passerer undersøgelsen, skal forældrene sørge for, at han drikker kogt vand hvert 10. minut i en halv time, før biomaterialet tages.

Dekryptering af de modtagne data

Afkodningen af ​​analysen kan repræsenteres af ord (i tilfælde af et kvalitativt studie), for eksempel "ikke detekteret" eller "under ændringsområdet". I det første tilfælde indikerer dette, at infektionen ikke blev registreret. I den anden - at viruset er til stede, men i små mængder. Denne situation kræver genforskning.

Viral belastning bestemmes af mængden af ​​infektiøs RNA og kaldes IE / ml eller kopier / ml.

En normal indikator (norm) for en kvantitativ analyse for hepatitis C er intervallet fra 1,8x102 til 2,4x107 IE / ml.

Koncentrationen af ​​virus i blodet kan være:

  • lav: fra 600 IE / ml til 3x10 4 / ml;
  • medium: fra 3x10 4 IE / ml til 8x10 5 IE / ml;
  • høj: mere end 8x10 5 IE / ml.

Kvantitativ og kvalitativ analyse af PCR for hepatitis tillader at bestemme tilstedeværelsen af ​​viruset i kroppen og niveauet af dets koncentration. En multidimensionel kædereaktion er i stand til at diagnosticere sygdommen i sine tidlige stadier, men for dette er det nødvendigt, at patienter så hurtigt som muligt kontakte medicinske institutioner for at få hjælp og nøje følge henstillingerne fra den behandlende læge.

PCR kvantitativ analyse

Metoden for kvantitativ PCR er en laboratorieundersøgelse, der giver dig mulighed for at identificere patogenet og bestemme dets mængde i kroppen. Denne metode gør det muligt ikke alene at opdage en mikroorganisme, men også at forstå, om det kan forårsage en sygdom.

Af særlig betydning er den kvantitative analyse af PCR ved diagnosticering og behandling af virusinfektioner.

Det er vigtigt! Med standard PCR er kvantitativ bestemmelse af patogener umulig.

Denne analyse er ikke egnet til nøjagtig diagnose af sygdomme, der forårsager opportunistiske patogener.

Kvantitativ analyse af PCR: kernen i metoden

PCR eller polymerasekædereaktion detekterer i materialet fragmenter af DNA og RNA af mikroorganismer.

Analysen er effektiv til at identificere alle typer mikroorganismer:

I undersøgelsen er der en selektiv kopiering af DNA- eller RNA-steder under indflydelse af enzymer.

Dette gør det muligt at bestemme patogenet selv med dets lave indhold i materialet. Kvantitativ PCR tæller efter hver kopi cyklus. På grund af dette ved analysens afslutning bliver den infektiøse belastning på kroppen kendt.

PCR kvantitativ analyse: fordele

Metoden har en række positive kvaliteter i sammenligning med andre laboratorieundersøgelser:

  • Hurtig analyse tilgængelighed - inden for 24 timer
  • Specificitet - PCR afslører præcis den mikroorganisme, der søges
  • Høj følsomhed - kun få patogenceller
  • Evnen til at tælle antallet af mikroorganismer
  • Du kan bestemme den specifikke stamme af patogenet
  • PCR registrerer mikroorganismer før immunresponset.
  • Evnen til at finde ud af effektiviteten af ​​terapi

Kombinationen af ​​disse faktorer gør kvantitativ analyse af PCR-højpræcisions laboratorieanalyse. Undersøgelser udført på ethvert stadium af sygdommen. En anden fordel ved kvantitativ PCR er evnen til at undersøge enhver form for materiale. Blod, urin, slimhindeudslæt, sæd, vævsprøver anvendes til analyse.

Ulempen ved metoden kan betragtes som dens relativt høje pris. Dette skyldes den høje pris på udstyr, der er nødvendigt for analysen.

PCR: en kvantitativ metode til diagnosticering af hepatitis C

Standard serologiske metoder tillader ikke at bestemme mængden af ​​virus i kroppen. For at finde ud af med sådanne test er sygdomsforløbet ikke muligt. Når en PCR-test er udført, registrerer den kvantitative metode den virale belastning nøjagtigt.

Ved hjælp af denne test kan du bestemme om viruset kan forårsage væsentlig skade på leverenvæv.

Husk! Jo lavere virusets indhold i blodet er, jo lavere er risikoen for infektion med deres seksuelle partner.

I hepatitis C udføres kvantitativ PCR før behandlingens begyndelse og efter 12 ugers behandling. Viral belastning anses for høj ved hastigheder over 800 * 10 3 eller 800.000 ME / ml.

Hvis undersøgelsesresultaterne overstiger 1 * 10 7 ME / ml, betyder dette et meget højt virusindhold.

Sådanne resultater på baggrund af behandlingen indikerer ineffektiviteten af ​​den valgte behandling. Hvis, efter starten af ​​et lægemiddelforløb, titrene af kvantitativ PCR reduceres, hvilket betyder, at behandlingen er effektiv. Beslutningen om kursets effektivitet og korrektion kan kun foretages af den behandlende læge.

Kvantitativ PCR for hepatitis C kræver samtidig undersøgelse af biokemiske blodparametre. Det er nødvendigt at overvåge niveauet af hepatiske transaminaser og vurdere leverskade.

PCR-kvantitativ metode udføres i laboratoriet på vores klinik. Ifølge resultatet af undersøgelsen kan du få lægehjælp.

For at bestå en kvantitativ analyse af PCR kan findes i vores klinik, kontakt os venligst.